Η σπλαχνική λεϊσμανίαση (VL), γνωστή ως καλααζάρ στην ινδική υποήπειρο, είναι μια παρασιτική ασθένεια που προκαλείται από το μαστιγωτό πρωτόζωο Λεϊσμανία και μπορεί να είναι θανατηφόρα εάν δεν αντιμετωπιστεί έγκαιρα. Η αμμόμυγα Phlebotomus argentipes είναι ο μόνος επιβεβαιωμένος φορέας VL στη Νοτιοανατολική Ασία, όπου ελέγχεται με υπολειμματικό ψεκασμό εσωτερικού χώρου (IRS), ένα συνθετικό εντομοκτόνο. Η χρήση του DDT σε προγράμματα ελέγχου VL είχε ως αποτέλεσμα την ανάπτυξη ανθεκτικότητας στις αμμόμυγες, έτσι το DDT αντικαταστάθηκε από το εντομοκτόνο alpha-cypermethrin. Ωστόσο, η άλφα-κυπερμεθρίνη δρα παρόμοια με το DDT, επομένως ο κίνδυνος αντοχής στις αμμόμυγες αυξάνεται υπό το στρες που προκαλείται από την επανειλημμένη έκθεση σε αυτό το εντομοκτόνο. Σε αυτή τη μελέτη, αξιολογήσαμε την ευαισθησία των άγριων κουνουπιών και των απογόνων τους F1 χρησιμοποιώντας τη βιοδοκιμασία φιάλης CDC.
Συλλέξαμε κουνούπια από 10 χωριά στην περιοχή Muzaffarpur του Bihar της Ινδίας. Οκτώ χωριά συνέχισαν να χρησιμοποιούν υψηλής ισχύοςκυπερμεθρίνηγια ψεκασμό σε εσωτερικούς χώρους, ένα χωριό σταμάτησε να χρησιμοποιεί κυπερμεθρίνη υψηλής ισχύος για ψεκασμό εσωτερικών χώρων και ένα χωριό δεν χρησιμοποίησε ποτέ κυπερμεθρίνη υψηλής ισχύος για ψεκασμό εσωτερικών χώρων. Τα συλλεχθέντα κουνούπια εκτέθηκαν σε μια προκαθορισμένη διαγνωστική δόση για καθορισμένο χρόνο (3 μg/ml για 40 λεπτά) και ο ρυθμός εξουδετέρωσης και η θνησιμότητα καταγράφηκαν 24 ώρες μετά την έκθεση.
Τα ποσοστά θανάτωσης των άγριων κουνουπιών κυμαίνονταν από 91,19% έως 99,47%, και αυτά των γενεών F1 κυμαίνονταν από 91,70% έως 98,89%. Είκοσι τέσσερις ώρες μετά την έκθεση, η θνησιμότητα των άγριων κουνουπιών κυμαινόταν από 89,34% έως 98,93%, και αυτή της γενιάς F1 κυμαινόταν από 90,16% έως 98,33%.
Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης υποδεικνύουν ότι μπορεί να αναπτυχθεί αντοχή στο P. argentipes, υποδεικνύοντας την ανάγκη για συνεχή παρακολούθηση και επαγρύπνηση για τη διατήρηση του ελέγχου μόλις επιτευχθεί η εκρίζωση.
Η σπλαχνική λεϊσμανίαση (VL), γνωστή ως καλααζάρ στην ινδική υποήπειρο, είναι μια παρασιτική ασθένεια που προκαλείται από το μαστιγωτό πρωτόζωο Leishmania και μεταδίδεται μέσω του δαγκώματος μολυσμένων θηλυκών μυγών (Diptera: Myrmecophaga). Οι μύγες της άμμου είναι ο μόνος επιβεβαιωμένος φορέας VL στη Νοτιοανατολική Ασία. Η Ινδία είναι κοντά στην επίτευξη του στόχου της εξάλειψης του VL. Ωστόσο, για να διατηρηθούν χαμηλά ποσοστά επίπτωσης μετά την εκρίζωση, είναι σημαντικό να μειωθεί ο πληθυσμός των φορέων για να αποτραπεί η πιθανή μετάδοση.
Ο έλεγχος των κουνουπιών στη Νοτιοανατολική Ασία επιτυγχάνεται μέσω υπολειμματικού ψεκασμού σε εσωτερικούς χώρους (IRS) με χρήση συνθετικών εντομοκτόνων. Η μυστική συμπεριφορά ανάπαυσης των silverlegs τα καθιστά κατάλληλο στόχο για έλεγχο εντομοκτόνων μέσω υπολειμματικών ψεκασμών σε εσωτερικούς χώρους [1]. Ο υπολειπόμενος ψεκασμός διχλωροδιφαινυλοτριχλωροαιθανίου (DDT) σε εσωτερικούς χώρους στο πλαίσιο του Εθνικού Προγράμματος Ελέγχου της Ελονοσίας στην Ινδία είχε σημαντικές δευτερογενείς επιπτώσεις στον έλεγχο των πληθυσμών των κουνουπιών και στη σημαντική μείωση των κρουσμάτων VL [2]. Αυτός ο απρογραμμάτιστος έλεγχος του VL ώθησε το Ινδικό Πρόγραμμα Εκρίζωσης VL να υιοθετήσει τον υπολειπόμενο ψεκασμό σε εσωτερικούς χώρους ως την κύρια μέθοδο ελέγχου των silverlegs. Το 2005, οι κυβερνήσεις της Ινδίας, του Μπαγκλαντές και του Νεπάλ υπέγραψαν μνημόνιο κατανόησης με στόχο την εξάλειψη του VL έως το 2015 [3]. Οι προσπάθειες εκρίζωσης, που περιλαμβάνουν συνδυασμό ελέγχου φορέων και ταχείας διάγνωσης και θεραπείας ανθρώπινων περιπτώσεων, είχαν ως στόχο να εισέλθουν στη φάση ενοποίησης έως το 2015, στόχος που αναθεωρήθηκε στη συνέχεια για το 2017 και στη συνέχεια το 2020.[4] Ο νέος παγκόσμιος οδικός χάρτης για την εξάλειψη των παραμελημένων τροπικών ασθενειών περιλαμβάνει την εξάλειψη της VL έως το 2030.[5]
Καθώς η Ινδία εισέρχεται στη φάση μετά την εκρίζωση του BCVD, είναι επιτακτική ανάγκη να διασφαλιστεί ότι δεν θα αναπτυχθεί σημαντική αντίσταση στη βήτα-κυπερμεθρίνη. Ο λόγος για την αντίσταση είναι ότι τόσο το DDT όσο και η κυπερμεθρίνη έχουν τον ίδιο μηχανισμό δράσης, δηλαδή στοχεύουν την πρωτεΐνη VGSC[21]. Έτσι, ο κίνδυνος ανάπτυξης αντοχής στις αμμόμυγες μπορεί να αυξηθεί από το στρες που προκαλείται από την τακτική έκθεση σε πολύ ισχυρή κυπερμεθρίνη. Ως εκ τούτου, είναι επιτακτική η παρακολούθηση και ο εντοπισμός πιθανών πληθυσμών αμμομυγών ανθεκτικών σε αυτό το εντομοκτόνο. Σε αυτό το πλαίσιο, ο στόχος αυτής της μελέτης ήταν η παρακολούθηση της κατάστασης ευαισθησίας των άγριων αμμόμυγων χρησιμοποιώντας διαγνωστικές δόσεις και διάρκειες έκθεσης που καθορίστηκαν από τους Chaubey et al. [20] μελέτησε το P. argentipes από διαφορετικά χωριά στην περιοχή Muzaffarpur του Bihar, Ινδία, το οποίο χρησιμοποιούσε συνεχώς συστήματα ψεκασμού εσωτερικών χώρων επεξεργασμένα με cypermethrin (συνεχή χωριά IPS). Η κατάσταση ευαισθησίας του άγριου P. argentipes από χωριά που είχαν σταματήσει να χρησιμοποιούν συστήματα ψεκασμού εσωτερικών χώρων με επεξεργασία με cypermethrin (πρώην χωριά IPS) και εκείνων που δεν είχαν χρησιμοποιήσει ποτέ συστήματα ψεκασμού εσωτερικών χώρων με cypermethrin (χωριά χωρίς IPS) συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας τη βιοδοκιμασία φιάλης CDC.
Δέκα χωριά επιλέχθηκαν για τη μελέτη (Εικ. 1, Πίνακας 1), εκ των οποίων τα οκτώ είχαν ιστορικό συνεχούς ψεκασμού σε εσωτερικούς χώρους συνθετικών πυρεθροειδών (υπερμεθρίνη· χαρακτηρίστηκαν ως χωριά συνεχούς υπερμεθρίνης) και είχαν κρούσματα VL (τουλάχιστον ένα κρούσμα) τα τελευταία 3 χρόνια. Από τα υπόλοιπα δύο χωριά της μελέτης, ένα χωριό που δεν πραγματοποίησε ψεκασμό βήτα-κυπερμεθρίνης σε εσωτερικούς χώρους (χωρίς μη εσωτερικών ψεκασμών) επιλέχθηκε ως χωριό ελέγχου και το άλλο χωριό που είχε διακοπτόμενο εσωτερικό ψεκασμό βήτα-κυπερμεθρίνης (διακοπτόμενος εσωτερικός ψεκασμός χωριού/πρώην κλειστού χωριού) επιλέχθηκε ως έλεγχος ψεκασμού. Η επιλογή αυτών των χωριών βασίστηκε σε συντονισμό με το Υπουργείο Υγείας και την Ομάδα Ψεκασμού Εσωτερικών Χωριών και στην επικύρωση του Μικρο Σχεδίου Δράσης Ψεκασμού Εσωτερικών Χωριών στην περιοχή Muzaffarpur.
Γεωγραφικός χάρτης της περιοχής Muzaffarpur που δείχνει τις τοποθεσίες των χωριών που περιλαμβάνονται στη μελέτη (1–10). Τοποθεσίες μελέτης: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Σιμάρα. Ο χάρτης ετοιμάστηκε με χρήση λογισμικού QGIS (έκδοση 3.30.3) και Open Assessment Shapefile.
Οι φιάλες για τα πειράματα έκθεσης παρασκευάστηκαν σύμφωνα με τις μεθόδους των Chaubey et al. [20] και Denlinger et al. [22]. Εν συντομία, παρασκευάστηκαν γυάλινες φιάλες 500 mL μία ημέρα πριν από το πείραμα και το εσωτερικό τοίχωμα των φιαλών επικαλύφθηκε με το ενδεικνυόμενο εντομοκτόνο (η διαγνωστική δόση α-κυπερμεθρίνης ήταν 3 μg/mL) με την εφαρμογή ενός διαλύματος ακετόνης του εντομοκτόνου (2,0 mL) στον πάτο, στα τοιχώματα και το καπάκι του μπουκαλιού. Κάθε φιάλη στη συνέχεια στέγνωσε σε μηχανικό κύλινδρο για 30 λεπτά. Κατά τη διάρκεια αυτής της περιόδου, ξεβιδώστε αργά το καπάκι για να εξατμιστεί η ακετόνη. Μετά από 30 λεπτά στεγνώματος, αφαιρέστε το καπάκι και περιστρέψτε το μπουκάλι μέχρι να εξατμιστεί όλη η ακετόνη. Τα μπουκάλια στη συνέχεια αφέθηκαν ανοιχτά για να στεγνώσουν όλη τη νύχτα. Για κάθε επαναληπτική δοκιμή, μία φιάλη, που χρησιμοποιήθηκε ως έλεγχος, επικαλύφθηκε με 2,0 mL ακετόνης. Όλες οι φιάλες επαναχρησιμοποιήθηκαν καθ' όλη τη διάρκεια των πειραμάτων μετά από κατάλληλο καθαρισμό σύμφωνα με τη διαδικασία που περιγράφεται από τους Denlinger et al. και τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας [22, 23].
Την επομένη της προετοιμασίας του εντομοκτόνου, 30–40 άγρια κουνούπια (που πεινούσαν θηλυκά) αφαιρέθηκαν από τα κλουβιά σε φιαλίδια και εμφυσήθηκαν απαλά σε κάθε φιαλίδιο. Περίπου ο ίδιος αριθμός μυγών χρησιμοποιήθηκε για κάθε μπουκάλι επικαλυμμένο με εντομοκτόνο, συμπεριλαμβανομένου του ελέγχου. Επαναλάβετε αυτό τουλάχιστον πέντε έως έξι φορές σε κάθε χωριό. Μετά από 40 λεπτά έκθεσης στο εντομοκτόνο, καταγράφηκε ο αριθμός των μυγών που γκρεμίστηκαν. Όλες οι μύγες αιχμαλωτίστηκαν με μηχανικό αναρροφητή, τοποθετήθηκαν σε δοχεία από χαρτόνι πίντας καλυμμένα με λεπτό πλέγμα και τοποθετήθηκαν σε ξεχωριστό επωαστήρα υπό τις ίδιες συνθήκες υγρασίας και θερμοκρασίας με την ίδια πηγή τροφής (μπαλάκια βαμβακιού εμποτισμένα σε διάλυμα ζάχαρης 30%) με τις αποικίες που δεν υποβλήθηκαν σε επεξεργασία. Η θνησιμότητα καταγράφηκε 24 ώρες μετά την έκθεση στο εντομοκτόνο. Όλα τα κουνούπια τεμαχίστηκαν και εξετάστηκαν για να επιβεβαιωθεί η ταυτότητα του είδους. Η ίδια διαδικασία έγινε και με τις μύγες απογόνους F1. Τα ποσοστά νοκ ντάουν και θνησιμότητας καταγράφηκαν 24 ώρες μετά την έκθεση. Εάν η θνησιμότητα στις φιάλες ελέγχου ήταν < 5%, δεν έγινε διόρθωση θνησιμότητας στα αντίγραφα. Εάν η θνησιμότητα στη φιάλη ελέγχου ήταν ≥ 5% και ≤ 20%, η θνησιμότητα στις δοκιμαστικές φιάλες αυτού του αντιγράφου διορθώθηκε χρησιμοποιώντας τον τύπο του Abbott. Εάν η θνησιμότητα στην ομάδα ελέγχου υπερέβαινε το 20%, ολόκληρη η ομάδα δοκιμής απορρίφθηκε [24, 25, 26].
Μέση θνησιμότητα άγριων κουνουπιών P. argentipes. Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν τυπικά σφάλματα του μέσου όρου. Η τομή των δύο κόκκινων οριζόντιων γραμμών με το γράφημα (90% και 98% θνησιμότητα, αντίστοιχα) υποδεικνύει το παράθυρο θνησιμότητας στο οποίο μπορεί να αναπτυχθεί αντίσταση.[25]
Μέση θνησιμότητα των απογόνων F1 του P. argentipes που αλιεύονται άγρια. Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν τυπικά σφάλματα του μέσου όρου. Οι καμπύλες που τέμνονται από τις δύο κόκκινες οριζόντιες γραμμές (90% και 98% θνησιμότητα, αντίστοιχα) αντιπροσωπεύουν το εύρος θνησιμότητας στο οποίο μπορεί να αναπτυχθεί αντίσταση[25].
Τα κουνούπια στο χωριό ελέγχου/μη IRS (Manifulkaha) βρέθηκαν να είναι πολύ ευαίσθητα στα εντομοκτόνα. Η μέση θνησιμότητα (±SE) των άγριων κουνουπιών 24 ώρες μετά την καταστροφή και την έκθεση ήταν 99,47 ± 0,52% και 98,93 ± 0,65%, αντίστοιχα, και η μέση θνησιμότητα των απογόνων F1 ήταν 98,89 ± 1,1,11% και αντίστοιχα 98,89 ± 1,13% και 1,11% αντίστοιχα, αντίστοιχα. (Πίνακες 2, 3).
Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης υποδεικνύουν ότι οι μύγες με αργυρόποδα μπορεί να αναπτύξουν αντίσταση στη συνθετική πυρεθροειδή (SP) α-κυπερμεθρίνη σε χωριά όπου η πυρεθροειδής (SP) α-κυπερμεθρίνη χρησιμοποιήθηκε συστηματικά. Αντίθετα, οι μύγες με αργυρόποδα που συλλέχθηκαν από χωριά που δεν καλύπτονται από το πρόγραμμα IRS/ελέγχου βρέθηκαν να είναι πολύ ευαίσθητες. Η παρακολούθηση της ευαισθησίας των πληθυσμών των άγριων μυγών είναι σημαντική για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας των εντομοκτόνων που χρησιμοποιούνται, καθώς αυτές οι πληροφορίες μπορεί να βοηθήσουν στη διαχείριση της αντοχής στα εντομοκτόνα. Υψηλά επίπεδα αντοχής σε DDT έχουν αναφερθεί τακτικά σε μύγες από ενδημικές περιοχές του Μπιχάρ λόγω της ιστορικής πίεσης επιλογής από το IRS που χρησιμοποιεί αυτό το εντομοκτόνο [1].
Βρήκαμε ότι το P. argentipes είναι πολύ ευαίσθητο στα πυρεθροειδή και οι δοκιμές πεδίου στην Ινδία, το Μπαγκλαντές και το Νεπάλ έδειξαν ότι το IRS είχε υψηλή εντομολογική αποτελεσματικότητα όταν χρησιμοποιήθηκε σε συνδυασμό με κυπερμεθρίνη ή δελταμεθρίνη [19, 26, 27, 28, 29]. Πρόσφατα, οι Roy et al. [18] ανέφερε ότι ο P. argentipes είχε αναπτύξει αντίσταση στα πυρεθροειδή στο Νεπάλ. Η μελέτη μας για την ευαισθησία πεδίου έδειξε ότι οι μύγες με αργυρόποδα που συλλέχθηκαν από χωριά που δεν εκτέθηκαν στο IRS ήταν πολύ ευαίσθητες, αλλά οι μύγες που συλλέχθηκαν από χωριά διαλείπουσας/πρώην IRS και συνεχούς IRS (η θνησιμότητα κυμαινόταν από 90% έως 97% εκτός από τις αμμόμυγες από το Anandpur-Haruni, οι οποίες είχαν πιθανώς 89,34% θνησιμότητα μετά το stane). σε εξαιρετικά αποτελεσματική κυπερμεθρίνη [25]. Ένας πιθανός λόγος για την ανάπτυξη αυτής της αντίστασης είναι η πίεση που ασκείται από τα προγράμματα ψεκασμού ρουτίνας εσωτερικού χώρου (IRS) και τοπικών προγραμμάτων ψεκασμού, τα οποία είναι τυπικές διαδικασίες για τη διαχείριση εστιών καλααζάρ σε ενδημικές περιοχές/μπλοκ/χωριά. cypermethrin Δυστυχώς, τα ιστορικά δεδομένα ευαισθησίας για αυτήν την περιοχή, που ελήφθησαν με τη χρήση της βιοδοκιμασίας φιάλης CDC, δεν είναι διαθέσιμα για σύγκριση όλες οι προηγούμενες μελέτες έχουν παρακολουθήσει την ευαισθησία του P. argentipes χρησιμοποιώντας χαρτί εμποτισμένο με εντομοκτόνα της ΠΟΥ. gambiae), και η λειτουργική εφαρμογή αυτών των συγκεντρώσεων στις αμμόμυγες είναι ασαφής επειδή οι αμμόμυγες πετούν λιγότερο συχνά από τα κουνούπια και περνούν περισσότερο χρόνο σε επαφή με το υπόστρωμα στη βιοδοκιμασία [23].
Τα συνθετικά πυρεθροειδή χρησιμοποιούνται σε ενδημικές περιοχές VL του Νεπάλ από το 1992, εναλλάσσοντας με τα SP άλφα-κυπερμεθρίνη και λάμδα-κυαλοθρίνη για τον έλεγχο της αμμομύγας [31], και η δελταμεθρίνη χρησιμοποιείται επίσης στο Μπαγκλαντές από το 2012 [32]. Φαινοτυπική αντοχή έχει ανιχνευθεί σε άγριους πληθυσμούς αμμόμυγες με αργυρόποδα σε περιοχές όπου τα συνθετικά πυρεθροειδή έχουν χρησιμοποιηθεί για μεγάλο χρονικό διάστημα [18, 33, 34]. Μια μη συνώνυμη μετάλλαξη (L1014F) έχει ανιχνευθεί σε άγριους πληθυσμούς της ινδικής αμμόμυγας και έχει συσχετιστεί με αντοχή στο DDT, υποδηλώνοντας ότι η αντίσταση στα πυρεθροειδή προκύπτει σε μοριακό επίπεδο, καθώς τόσο το DDT όσο και το πυρεθροειδές (άλφα-κυπερμεθρίνη) στοχεύουν το ίδιο γονίδιο στο νευρικό σύστημα [17,3]. Ως εκ τούτου, η συστηματική αξιολόγηση της ευαισθησίας στην κυπερμεθρίνη και η παρακολούθηση της αντοχής στα κουνούπια είναι ουσιαστικής σημασίας κατά την περίοδο εκρίζωσης και μετά την εκρίζωση.
Ένας πιθανός περιορισμός αυτής της μελέτης είναι ότι χρησιμοποιήσαμε τη βιοδοκιμασία φιαλιδίου CDC για τη μέτρηση της ευαισθησίας, αλλά όλες οι συγκρίσεις χρησιμοποίησαν αποτελέσματα από προηγούμενες μελέτες που χρησιμοποιούν το κιτ βιοδοκιμασίας του ΠΟΥ. Τα αποτελέσματα από τις δύο βιοδοκιμές μπορεί να μην είναι άμεσα συγκρίσιμα, επειδή η βιοδοκιμασία φιαλιδίου CDC μετρά το knockdown στο τέλος της διαγνωστικής περιόδου, ενώ η βιοδοκιμασία κιτ ΠΟΥ μετρά τη θνησιμότητα 24 ή 72 ώρες μετά την έκθεση (η τελευταία για ενώσεις βραδείας δράσης) [35]. Ένας άλλος πιθανός περιορισμός είναι ο αριθμός των χωριών IRS σε αυτήν τη μελέτη σε σύγκριση με ένα χωριό που δεν ανήκει στο IRS και ένα χωριό που δεν ανήκει στο IRS/πρώην IRS. Δεν μπορούμε να υποθέσουμε ότι το επίπεδο ευαισθησίας σε φορείς κουνουπιών που παρατηρείται σε μεμονωμένα χωριά σε μια περιοχή είναι αντιπροσωπευτικό του επιπέδου ευαισθησίας σε άλλα χωριά και περιοχές στο Μπιχάρ. Καθώς η Ινδία εισέρχεται στη φάση μετά την εξάλειψη του ιού της λευχαιμίας, είναι επιτακτική ανάγκη να αποτραπεί η σημαντική ανάπτυξη ανθεκτικότητας. Απαιτείται ταχεία παρακολούθηση της αντοχής σε πληθυσμούς αμμομυγών από διαφορετικές περιοχές, τετράγωνα και γεωγραφικές περιοχές. Τα δεδομένα που παρουσιάζονται σε αυτή τη μελέτη είναι προκαταρκτικά και θα πρέπει να επαληθευτούν σε σύγκριση με τις συγκεντρώσεις αναγνώρισης που δημοσιεύθηκαν από τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας [35] για να αποκτήσετε μια πιο συγκεκριμένη ιδέα για την κατάσταση ευαισθησίας του P. argentipes σε αυτές τις περιοχές πριν τροποποιηθούν τα προγράμματα ελέγχου φορέων για τη διατήρηση χαμηλών πληθυσμών αμμομυγών και την υποστήριξη της εξάλειψης του ιού της λευχαιμίας.
Το κουνούπι P. argentipes, ο φορέας του ιού της λεύκωσης, μπορεί να αρχίσει να εμφανίζει πρώιμα σημάδια αντίστασης στην εξαιρετικά αποτελεσματική κυπερμεθρίνη. Η τακτική παρακολούθηση της αντοχής στα εντομοκτόνα σε άγριους πληθυσμούς του P. argentipes είναι απαραίτητη για τη διατήρηση του επιδημιολογικού αντίκτυπου των παρεμβάσεων ελέγχου φορέων. Η εναλλαγή εντομοκτόνων με διαφορετικούς τρόπους δράσης ή/και η αξιολόγηση και η καταγραφή νέων εντομοκτόνων είναι απαραίτητη και συνιστάται για τη διαχείριση της αντοχής στα εντομοκτόνα και την υποστήριξη της εξάλειψης του ιού της λεύκωσης στην Ινδία.
Ώρα δημοσίευσης: Φεβ-17-2025