Σας ευχαριστούμε που επισκεφτήκατε το Nature.com.Η έκδοση του προγράμματος περιήγησης που χρησιμοποιείτε έχει περιορισμένη υποστήριξη CSS.Για καλύτερα αποτελέσματα, συνιστούμε να χρησιμοποιήσετε μια νεότερη έκδοση του προγράμματος περιήγησής σας (ή να απενεργοποιήσετε τη λειτουργία συμβατότητας στον Internet Explorer).Στο μεταξύ, για να διασφαλίσουμε τη συνεχή υποστήριξη, προβάλλουμε τον ιστότοπο χωρίς στυλ ή JavaScript.
Τα μυκητοκτόνα χρησιμοποιούνται συχνά κατά την ανθοφορία των καρπών των δέντρων και μπορούν να απειλήσουν τους επικονιαστές των εντόμων.Ωστόσο, λίγα είναι γνωστά για το πώς οι επικονιαστές που δεν είναι μέλισσες (π.χ. μοναχικές μέλισσες, Osmia cornifrons) ανταποκρίνονται στην επαφή και στα συστηματικά μυκητοκτόνα που χρησιμοποιούνται συνήθως στα μήλα κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας.Αυτό το κενό γνώσης περιορίζει τις ρυθμιστικές αποφάσεις που καθορίζουν τις ασφαλείς συγκεντρώσεις και το χρονοδιάγραμμα του ψεκασμού με μυκητοκτόνο.Αξιολογήσαμε τα αποτελέσματα δύο μυκητοκτόνων επαφής (captan και mancozeb) και τεσσάρων μυκητοκτόνων ενδιάμεσης στιβάδας/φυτοσυστήματος (ciprocycline, myclobutanil, pyrostrobin και trifloxystrobin).Επιδράσεις στην αύξηση βάρους των προνυμφών, στην επιβίωση, στην αναλογία φύλου και στη βακτηριακή ποικιλότητα.Η αξιολόγηση διεξήχθη χρησιμοποιώντας μια χρόνια από του στόματος βιοδοκιμασία στην οποία η γύρη υποβλήθηκε σε θεραπεία σε τρεις δόσεις με βάση την τρέχουσα συνιστώμενη δόση για χρήση στο πεδίο (1Χ), μισή δόση (0,5Χ) και χαμηλή δόση (0,1Χ).Όλες οι δόσεις mancozeb και πυριτιζολίνης μείωσαν σημαντικά το σωματικό βάρος και την επιβίωση των προνυμφών.Στη συνέχεια προσδιορίσαμε την αλληλουχία του γονιδίου 16S για να χαρακτηρίσουμε το βακτηρίδιο της προνύμφης του mancozeb, του μυκητοκτόνου που ευθύνεται για την υψηλότερη θνησιμότητα.Βρήκαμε ότι η ποικιλότητα και η αφθονία των βακτηρίων μειώθηκαν σημαντικά σε προνύμφες που τρέφονταν με γύρη που είχε υποστεί αγωγή με mancozeb.Τα εργαστηριακά μας αποτελέσματα δείχνουν ότι ο ψεκασμός ορισμένων από αυτά τα μυκητοκτόνα κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας είναι ιδιαίτερα επιβλαβής για την υγεία του O. cornifrons.Αυτές οι πληροφορίες είναι σχετικές για μελλοντικές αποφάσεις διαχείρισης σχετικά με τη βιώσιμη χρήση προϊόντων προστασίας οπωροφόρων δέντρων και χρησιμεύουν ως βάση για ρυθμιστικές διαδικασίες που στοχεύουν στην προστασία των επικονιαστών.
Η μοναχική μέλισσα Osmia cornifrons (Hymenoptera: Megachilidae) εισήχθη στις Ηνωμένες Πολιτείες από την Ιαπωνία στα τέλη της δεκαετίας του 1970 και στις αρχές της δεκαετίας του 1980 και έκτοτε το είδος έπαιξε σημαντικό ρόλο επικονιαστή σε διαχειριζόμενα οικοσυστήματα.Οι πολιτογραφημένοι πληθυσμοί αυτής της μέλισσας αποτελούν μέρος περίπου 50 ειδών άγριων μελισσών που συμπληρώνουν τις μέλισσες που επικονιάζουν τους οπωρώνες αμυγδάλων και μήλων στις Ηνωμένες Πολιτείες2,3.Οι μέλισσες Mason αντιμετωπίζουν πολλές προκλήσεις, συμπεριλαμβανομένου του κατακερματισμού των οικοτόπων, των παθογόνων και των φυτοφαρμάκων3,4.Μεταξύ των εντομοκτόνων, τα μυκητοκτόνα μειώνουν το κέρδος ενέργειας, την αναζήτηση τροφής5 και την προετοιμασία του σώματος6,7.Παρόλο που πρόσφατη έρευνα υποδηλώνει ότι η υγεία των μελισσών Mason επηρεάζεται άμεσα από μικροοργανισμούς κοινών και εξωβακτικών, 8,9 επειδή τα βακτήρια και οι μύκητες μπορούν να επηρεάσουν τη διατροφή και τις ανοσολογικές αποκρίσεις, οι επιπτώσεις της έκθεσης σε μυκητοκτόνα στη μικροβιακή ποικιλομορφία των μελισσών Mason μόλις αρχίζουν να γίνονται μελετημένος.
Μυκητοκτόνα διαφόρων επιδράσεων (επαφών και συστηματικών) ψεκάζονται στους οπωρώνες πριν και κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας για την αντιμετώπιση ασθενειών όπως η ψώρα της μηλιάς, η πικρή σήψη, η καστανή σήψη και το ωίδιο10,11.Τα μυκητοκτόνα θεωρούνται αβλαβή για τους επικονιαστές, επομένως συνιστώνται στους κηπουρούς κατά την περίοδο της ανθοφορίας.Η έκθεση και η κατάποση αυτών των μυκητοκτόνων από τις μέλισσες είναι σχετικά γνωστή, καθώς αποτελεί μέρος της διαδικασίας καταχώρισης φυτοφαρμάκων από την Υπηρεσία Προστασίας του Περιβάλλοντος των ΗΠΑ και πολλούς άλλους εθνικούς ρυθμιστικούς φορείς12,13,14.Ωστόσο, οι επιδράσεις των μυκητοκτόνων σε μη μέλισσες είναι λιγότερο γνωστές επειδή δεν απαιτούνται βάσει των συμφωνιών άδειας κυκλοφορίας στις Ηνωμένες Πολιτείες15.Επιπλέον, γενικά δεν υπάρχουν τυποποιημένα πρωτόκολλα για τη δοκιμή μεμονωμένων μελισσών16,17 και η διατήρηση αποικιών που παρέχουν μέλισσες για δοκιμή είναι πρόκληση18.Δοκιμές διαφορετικών διαχειριζόμενων μελισσών διεξάγονται όλο και περισσότερο στην Ευρώπη και τις ΗΠΑ για τη μελέτη των επιπτώσεων των φυτοφαρμάκων στις άγριες μέλισσες και πρόσφατα αναπτύχθηκαν τυποποιημένα πρωτόκολλα για το O. cornifrons19.
Οι κερασφόρες μέλισσες είναι μονοκύτταρα και χρησιμοποιούνται στο εμπόριο σε καλλιέργειες κυπρίνου ως συμπλήρωμα ή υποκατάστατο των μελισσών.Αυτές οι μέλισσες αναδύονται μεταξύ Μαρτίου και Απριλίου, με τα πρώιμα αρσενικά να εμφανίζονται τρεις έως τέσσερις ημέρες πριν από τα θηλυκά.Μετά το ζευγάρωμα, το θηλυκό συλλέγει ενεργά γύρη και νέκταρ για να παράσχει μια σειρά από κύτταρα γόνου μέσα στη σωληνοειδή κοιλότητα της φωλιάς (φυσική ή τεχνητή)1,20.Τα αυγά τοποθετούνται στη γύρη μέσα στα κύτταρα.το θηλυκό στη συνέχεια χτίζει έναν τοίχο από πηλό πριν προετοιμάσει το επόμενο κελί.Οι προνύμφες του πρώτου σταδίου εγκλείονται στο χόριο και τρέφονται με εμβρυϊκά υγρά.Από το δεύτερο έως το πέμπτο στάδιο (prepupa), οι προνύμφες τρέφονται με γύρη22.Μόλις εξαντληθεί τελείως το απόθεμα γύρης, οι προνύμφες σχηματίζουν κουκούλια, νεογνά και αναδύονται ως ενήλικες στον ίδιο θάλαμο γόνου, συνήθως στα τέλη του καλοκαιριού20,23.Τα ενήλικα εμφανίζονται την επόμενη άνοιξη.Η επιβίωση των ενηλίκων σχετίζεται με την καθαρή αύξηση της ενέργειας (αύξηση βάρους) με βάση την πρόσληψη τροφής.Έτσι, η διατροφική ποιότητα της γύρης, καθώς και άλλοι παράγοντες όπως ο καιρός ή η έκθεση σε φυτοφάρμακα, είναι καθοριστικοί παράγοντες για την επιβίωση και την υγεία24.
Τα εντομοκτόνα και τα μυκητοκτόνα που εφαρμόζονται πριν από την ανθοφορία μπορούν να κινηθούν εντός των αγγείων του φυτού σε διάφορους βαθμούς, από διαστρωματικά (π.χ. ικανά να μετακινηθούν από την επάνω επιφάνεια των φύλλων στην κάτω επιφάνεια, όπως ορισμένα μυκητοκτόνα) 25 έως πραγματικά συστηματικά αποτελέσματα., που μπορούν να διαπεράσουν το στέμμα από τις ρίζες, μπορούν να εισέλθουν στο νέκταρ των ανθέων της μηλιάς26, όπου μπορούν να σκοτώσουν το ενήλικο O. cornifrons27.Ορισμένα φυτοφάρμακα διοχετεύονται επίσης στη γύρη, επηρεάζοντας την ανάπτυξη των προνυμφών αραβοσίτου και προκαλώντας το θάνατό τους19.Άλλες μελέτες έχουν δείξει ότι ορισμένα μυκητοκτόνα μπορούν να αλλάξουν σημαντικά τη συμπεριφορά φωλεοποίησης του συγγενικού είδους O. lignaria28.Επιπλέον, εργαστηριακές και επιτόπιες μελέτες που προσομοιώνουν σενάρια έκθεσης σε φυτοφάρμακα (συμπεριλαμβανομένων των μυκητοκτόνων) έχουν δείξει ότι τα φυτοφάρμακα επηρεάζουν αρνητικά τη φυσιολογία 22 μορφολογία 29 και την επιβίωση των μελισσών και ορισμένων μοναχικών μελισσών.Διάφοροι μυκητοκτόνοι ψεκασμοί που εφαρμόζονται απευθείας σε ανοιχτά άνθη κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας μπορεί να μολύνουν τη γύρη που συλλέγεται από ενήλικα για την ανάπτυξη των προνυμφών, τα αποτελέσματα των οποίων μένει να μελετηθούν30.
Αναγνωρίζεται όλο και περισσότερο ότι η ανάπτυξη των προνυμφών επηρεάζεται από τη γύρη και τις μικροβιακές κοινότητες του πεπτικού συστήματος.Το μικροβίωμα της μέλισσας επηρεάζει παραμέτρους όπως η μάζα σώματος31, οι μεταβολικές αλλαγές22 και η ευαισθησία στα παθογόνα32.Προηγούμενες μελέτες έχουν εξετάσει την επίδραση του αναπτυξιακού σταδίου, των θρεπτικών ουσιών και του περιβάλλοντος στο μικροβίωμα των μοναχικών μελισσών.Αυτές οι μελέτες αποκάλυψαν ομοιότητες στη δομή και την αφθονία των μικροβιωμάτων της προνύμφης και της γύρης33, καθώς και στα πιο κοινά βακτηριακά γένη Pseudomonas και Delftia, μεταξύ των μοναχικών ειδών μελισσών.Ωστόσο, αν και τα μυκητοκτόνα έχουν συσχετιστεί με στρατηγικές για την προστασία της υγείας των μελισσών, οι επιδράσεις των μυκητοκτόνων στη μικροχλωρίδα των προνυμφών μέσω της άμεσης στοματικής έκθεσης παραμένουν ανεξερεύνητες.
Αυτή η μελέτη εξέτασε τις επιδράσεις πραγματικών δόσεων έξι συνήθως χρησιμοποιούμενων μυκητοκτόνων που έχουν καταχωριστεί για χρήση σε καρπούς δέντρων στις Ηνωμένες Πολιτείες, συμπεριλαμβανομένων των μυκητοκτόνων επαφής και συστημικών μυκητοκτόνων που χορηγούνται από το στόμα σε προνύμφες σκώρων από μολυσμένα τρόφιμα.Βρήκαμε ότι τα εξ επαφής και τα συστηματικά μυκητοκτόνα μείωσαν την αύξηση του σωματικού βάρους των μελισσών και αύξησαν τη θνησιμότητα, με τις πιο σοβαρές επιπτώσεις να σχετίζονται με το mancozeb και το pyrithiopide.Στη συνέχεια, συγκρίναμε τη μικροβιακή ποικιλομορφία των προνυμφών που τρέφονταν με τη δίαιτα γύρης που έλαβε θεραπεία με mancozeb με εκείνες που τρέφονταν με τη δίαιτα ελέγχου.Συζητάμε τους πιθανούς μηχανισμούς στους οποίους βασίζεται η θνησιμότητα και οι επιπτώσεις για τα προγράμματα ολοκληρωμένης διαχείρισης παρασίτων και επικονιαστών (IPPM)36.
Τα ενήλικα O. cornifrons που διαχειμάζουν σε κουκούλια ελήφθησαν από το Fruit Research Center, Biglerville, PA, και αποθηκεύτηκαν στους -3 έως 2°C (±0,3°C).Πριν το πείραμα (600 κουκούλια συνολικά).Τον Μάιο του 2022, 100 κουκούλια O. cornifrons μεταφέρθηκαν καθημερινά σε πλαστικά κύπελλα (50 κουκούλια ανά φλιτζάνι, DI 5 cm × 15 cm μήκος) και μαντηλάκια τοποθετήθηκαν μέσα στα κύπελλα για να διευκολύνουν το άνοιγμα και να παρέχουν ένα μασώμενο υπόστρωμα, μειώνοντας την πίεση στο πετρώδες μέλισσες37 .Τοποθετήστε δύο πλαστικά κύπελλα που περιέχουν κουκούλια σε ένα κλουβί εντόμων (30 × 30 × 30 cm, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) με τροφοδότες 10 ml που περιέχουν 50% διάλυμα σακχαρόζης και αποθηκεύστε για τέσσερις ημέρες για να εξασφαλίσετε το κλείσιμο και το ζευγάρωμα.23°C, σχετική υγρασία 60%, φωτοπερίοδος 10 l (χαμηλή ένταση): 14 ημέρες.100 ζευγαρωμένα θηλυκά και αρσενικά απελευθερώνονταν κάθε πρωί για έξι ημέρες (100 την ημέρα) σε δύο τεχνητές φωλιές κατά τη διάρκεια της κορυφαίας ανθοφορίας των μήλων (φωλιά παγίδας: πλάτος 33,66 × ύψος 30,48 × μήκος 46,99 cm· Συμπληρωματικό σχήμα 1 ).Τοποθετημένο στο Pennsylvania State Arboretum, κοντά σε κεράσι (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), ροδάκινο (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), αχλάδι (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia ' Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), μηλιά coronaria (Malus coronaria) και πολυάριθμες ποικιλίες μηλιών (Malus coronaria, Malus), εγχώρια μηλιά 'Co-op 30' Enterprise™, Malus apple tree 'Co- Op 31′ Winecrisp™, begonia 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy').Κάθε μπλε πλαστικό σπιτάκι πουλιών χωράει πάνω από δύο ξύλινα κουτιά.Κάθε κουτί φωλιάς περιείχε 800 άδειους σωλήνες από χαρτί κραφτ (σπιράλ ανοιχτός, 0,8 cm ID × 15 cm L) (Jonesville Paper Tube Co., Michigan) τοποθετημένοι σε αδιαφανείς σωλήνες σελοφάν (0,7 OD βλ. Πλαστικά βύσματα (βύσματα T-1X) παρέχουν θέσεις φωλιάς .
Και οι δύο φωλιές έβλεπαν προς τα ανατολικά και καλύφθηκαν με πράσινη πλαστική περίφραξη κήπου (Everbilt μοντέλο #889250EB12, μέγεθος ανοίγματος 5 × 5 cm, 0,95 m × 100 m) για την αποφυγή πρόσβασης τρωκτικών και πουλιών και τοποθετήθηκαν στην επιφάνεια του εδάφους δίπλα στο χώμα του κουτιού φωλιάς κουτιά.Κουτί φωλιάς (Συμπληρωματικό Σχήμα 1α).Τα αυγά του καλαμποκιού συλλέγονταν καθημερινά με τη συλλογή 30 σωλήνων από τις φωλιές και τη μεταφορά τους στο εργαστήριο.Χρησιμοποιώντας ψαλίδι, κάντε μια τομή στο άκρο του σωλήνα και, στη συνέχεια, αποσυναρμολογήστε τον σπειροειδή σωλήνα για να εκθέσετε τα κύτταρα γόνου.Τα μεμονωμένα αυγά και η γύρη τους αφαιρέθηκαν χρησιμοποιώντας κυρτή σπάτουλα (εργαλειοθήκη Microslide, BioQuip Products Inc., Καλιφόρνια).Τα αυγά επωάστηκαν σε υγρό διηθητικό χαρτί και τοποθετήθηκαν σε ένα τρυβλίο Petri για 2 ώρες πριν χρησιμοποιηθούν στα πειράματά μας (Συμπληρωματικό Σχήμα 1b-d).
Στο εργαστήριο, αξιολογήσαμε την στοματική τοξικότητα έξι μυκητοκτόνων που εφαρμόστηκαν πριν και κατά τη διάρκεια της άνθης της μηλιάς σε τρεις συγκεντρώσεις (0,1Χ, 0,5Χ και 1Χ, όπου 1Χ είναι η ένδειξη που εφαρμόζεται ανά 100 γαλόνια νερού/στρέμμα. Υψηλή δόση πεδίου = συγκέντρωση στο πεδίο)., Τραπέζι 1).Κάθε συγκέντρωση επαναλήφθηκε 16 φορές (n = 16).Δύο μυκητοκτόνα επαφής (Πίνακας S1: mancozeb 2696,14 ppm και captan 2875,88 ppm) και τέσσερα συστηματικά μυκητοκτόνα (Πίνακας S1: pyrithiostrobin 250,14 ppm, trifloxystrobin 110,06 ppm, μυκλοβουτανίλη azole .804 φρούτα, λαχανικά και καλλωπιστικές καλλιέργειες .Ομογενοποιήσαμε τη γύρη χρησιμοποιώντας ένα μύλο, μεταφέραμε 0,20 g σε ένα φρεάτιο (24 φρεατίων Falcon Plate) και προσθέσαμε και αναμείξαμε 1 μL μυκητοκτόνου διαλύματος για να σχηματίσουμε πυραμιδική γύρη με φρεάτια βάθους 1 mm στα οποία τοποθετήθηκαν τα αυγά.Τοποθετήστε χρησιμοποιώντας μια μίνι σπάτουλα (Συμπληρωματικό Σχήμα 1γ,δ).Οι πλάκες Falcon αποθηκεύτηκαν σε θερμοκρασία δωματίου (25°C) και σχετική υγρασία 70%.Τα συγκρίναμε με προνύμφες ελέγχου που τρέφονταν με ομοιογενή δίαιτα γύρης που είχε υποστεί επεξεργασία με καθαρό νερό.Καταγράψαμε τη θνησιμότητα και μετρήσαμε το βάρος της προνύμφης κάθε δεύτερη μέρα έως ότου οι προνύμφες φτάσουν στην προνυμφική ηλικία χρησιμοποιώντας μια αναλυτική ισορροπία (Fisher Scientific, ακρίβεια = 0,0001 g).Τέλος, η αναλογία φύλου αξιολογήθηκε ανοίγοντας το κουκούλι μετά από 2,5 μήνες.
Εξήχθη DNA από ολόκληρες προνύμφες O. cornifrons (n = 3 ανά συνθήκη θεραπείας, γύρη που υποβλήθηκε σε θεραπεία με mancozeb και χωρίς θεραπεία) και πραγματοποιήσαμε αναλύσεις μικροβιακής ποικιλότητας σε αυτά τα δείγματα, ειδικά επειδή στο mancozeb η υψηλότερη θνησιμότητα παρατηρήθηκε στις προνύμφες.λήψη MnZn.Το DNA ενισχύθηκε, καθαρίστηκε χρησιμοποιώντας το κιτ DNA DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead (Zymo Research, Irvine, CA) και αναλύθηκε η αλληλουχία (600 κύκλοι) σε ένα Illumina® MiSeq™ χρησιμοποιώντας το κιτ v3.Η στοχευμένη αλληλουχία βακτηριακών 16S ριβοσωμικών γονιδίων RNA πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το κιτ προετοιμασίας βιβλιοθήκης Quick-16S™ NGS (Zymo Research, Irvine, CA) χρησιμοποιώντας εκκινητές που στοχεύουν την περιοχή V3-V4 του γονιδίου 16S rRNA.Επιπροσθέτως, πραγματοποιήθηκε αλληλούχιση 18S χρησιμοποιώντας 10% εγκλεισμό PhiX και η ενίσχυση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το ζεύγος εκκινητών 18S001 και NS4.
Εισαγάγετε και διεργασίες ζευγοποιημένες αναγνώσεις39 χρησιμοποιώντας τη διοχέτευση QIIME2 (v2022.11.1).Αυτές οι αναγνώσεις περικόπηκαν και συγχωνεύτηκαν και οι χιμαιρικές ακολουθίες αφαιρέθηκαν χρησιμοποιώντας το πρόσθετο DADA2 στο QIIME2 (qiime dada2 noise pairing)40.Οι εκχωρήσεις κλάσεων 16S και 18S πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας το πρόσθετο ταξινομητή αντικειμένων Classify-sklearn και τον προεκπαιδευμένο ταξινομητή artifact silva-138-99-nb.
Όλα τα πειραματικά δεδομένα ελέγχθηκαν ως προς την κανονικότητα (Shapiro-Wilks) και την ομοιογένεια των διακυμάνσεων (δοκιμή Levene).Επειδή το σύνολο δεδομένων δεν πληρούσε τις παραδοχές της παραμετρικής ανάλυσης και ο μετασχηματισμός απέτυχε να τυποποιήσει τα υπολείμματα, πραγματοποιήσαμε μια μη παραμετρική αμφίδρομη ANOVA (Kruskal-Wallis) με δύο παράγοντες [χρόνος (τρεις φάσεις 2, 5 και 8 ημέρες χρονικά σημεία) και μυκητοκτόνο] για την αξιολόγηση της επίδρασης της αγωγής στο φρέσκο βάρος των προνυμφών, στη συνέχεια πραγματοποιήθηκαν post hoc μη παραμετρικές συγκρίσεις ανά ζεύγη χρησιμοποιώντας τη δοκιμή Wilcoxon.Χρησιμοποιήσαμε ένα γενικευμένο γραμμικό μοντέλο (GLM) με κατανομή Poisson για να συγκρίνουμε τις επιδράσεις των μυκητοκτόνων στην επιβίωση σε τρεις συγκεντρώσεις μυκητοκτόνου41,42.Για ανάλυση διαφορικής αφθονίας, ο αριθμός των παραλλαγών αλληλουχίας αμπλικονίου (ASVs) συμπτύχθηκε σε επίπεδο γένους.Οι συγκρίσεις της διαφορικής αφθονίας μεταξύ ομάδων που χρησιμοποιούν σχετική αφθονία 16S (επίπεδο γένους) και 18S πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας ένα γενικευμένο προσθετικό μοντέλο για τη θέση, την κλίμακα και το σχήμα (GAMLSS) με κατανομές οικογένειας βήτα μηδενικής διόγκωσης (BEZI), οι οποίες μοντελοποιήθηκαν σε μακροεντολή .στο Microbiome R43 (v1.1).1).Αφαιρέστε τα είδη μιτοχονδρίων και χλωροπλαστών πριν από τη διαφορική ανάλυση.Λόγω των διαφορετικών ταξινομικών επιπέδων του 18S, μόνο το χαμηλότερο επίπεδο κάθε ταξινομίας χρησιμοποιήθηκε για διαφορικές αναλύσεις.Όλες οι στατιστικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας R (έκδ. 3.4.3., έργο CRAN) (Team 2013).
Η έκθεση σε mancozeb, pyrithiostrobin και trifloxystrobin μείωσε σημαντικά την αύξηση του σωματικού βάρους στο O. cornifrons (Εικ. 1).Αυτές οι επιδράσεις παρατηρήθηκαν με συνέπεια και για τις τρεις δόσεις που αξιολογήθηκαν (Εικ. 1α-γ).Η Cyclostrobin και η Myclobutanil δεν μείωσαν σημαντικά το βάρος των προνυμφών.
Το μέσο φρέσκο βάρος των προνυμφών των βλαστικών τρεχόντων μετρήθηκε σε τρία χρονικά σημεία κάτω από τέσσερις διαιτητικές αγωγές (ομογενής τροφή γύρης + μυκητοκτόνο: έλεγχος, δόσεις 0,1Χ, 0,5Χ και 1Χ).(α) Χαμηλή δόση (0,1Χ): πρώτο χρονικό σημείο (ημέρα 1): χ2: 30,99, DF = 6;P < 0,0001, δεύτερο χρονικό σημείο (ημέρα 5): 22,83, DF = 0,0009;τρίτη φορά;σημείο (ημέρα 8): χ2: 28.39, DF = 6;(β) μισή δόση (0,5Χ): πρώτο χρονικό σημείο (ημέρα 1): χ2: 35,67, DF = 6;P < 0,0001, δεύτερο χρονικό σημείο (πρώτη ημέρα).): χ2: 15,98, DF = 6;Ρ = 0,0090;τρίτο χρονικό σημείο (ημέρα 8) χ2: 16.47, DF = 6;(γ) Τοποθέτηση ή πλήρης δόση (1Χ): σημείο πρώτου χρόνου (ημέρα 1) χ2: 20,64, P = 6;P = 0,0326, δεύτερο χρονικό σημείο (ημέρα 5): χ2: 22,83, DF = 6;P = 0,0009;τρίτο χρονικό σημείο (ημέρα 8): χ2: 28.39, DF = 6;μη παραμετρική ανάλυση διασποράς.Οι ράβδοι αντιπροσωπεύουν μέσο όρο ± SE συγκρίσεων ανά ζεύγη (α = 0,05) (n = 16) *P ≤ 0,05, **P ≤ 0,001, ***P ≤ 0,0001.
Στη χαμηλότερη δόση (0,1Χ), το σωματικό βάρος της προνύμφης μειώθηκε κατά 60% με το trifloxystrobin, 49% με το mancozeb, 48% με το myclobutanil και 46% με το pyrithistrobin (Εικ. 1a).Όταν εκτέθηκε στο μισό της δόσης πεδίου (0,5Χ), το σωματικό βάρος των προνυμφών mancozeb μειώθηκε κατά 86%, η πυριθειοστροβίνη κατά 52% και η τριφλοξυστροβίνη κατά 50% (Εικ. 1β).Μια δόση πλήρους πεδίου (1Χ) mancozeb μείωσε το βάρος της προνύμφης κατά 82%, την πυριθειοστροβίνη κατά 70%, και την τριφλοξυστροβίνη, τη μυκλοβουτανίλη και το σάνγκαρντ κατά περίπου 30% (Εικ. 1γ).
Η θνησιμότητα ήταν υψηλότερη μεταξύ των προνυμφών που τρέφονταν με γύρη με mancozeb, ακολουθούμενη από την πυριθειοστροβίνη και την τριφλοξυστροβίνη.Η θνησιμότητα αυξήθηκε με αυξανόμενες δόσεις mancozeb και πυριτιζολίνης (Εικ. 2, Πίνακας 2).Ωστόσο, η θνησιμότητα από το τρύπημα του καλαμποκιού αυξήθηκε ελάχιστα καθώς αυξήθηκαν οι συγκεντρώσεις τριφλοξυστροβίνης.Η κυπροδινίλη και η καπτάνη δεν αύξησαν σημαντικά τη θνησιμότητα σε σύγκριση με τις θεραπείες ελέγχου.
Η θνησιμότητα των προνυμφών της τρυπητή μύγας συγκρίθηκε μετά την κατάποση γύρης που υποβλήθηκε σε ατομική αγωγή με έξι διαφορετικά μυκητοκτόνα.Το Mancozeb και η πεντοπυραμίδη ήταν πιο ευαίσθητα στην από του στόματος έκθεση σε σκουλήκια καλαμποκιού (GLM: χ = 29,45, DF = 20, P = 0,0059) (γραμμή, κλίση = 0,29, P < 0,001, κλίση = 0,24, P <0).
Κατά μέσο όρο, σε όλες τις θεραπείες, το 39,05% των ασθενών ήταν γυναίκες και το 60,95% ήταν άνδρες.Μεταξύ των θεραπειών ελέγχου, το ποσοστό των γυναικών ήταν 40% και στις μελέτες χαμηλής δόσης (0,1Χ) και μισής δόσης (0,5Χ) και 30% στις μελέτες επιτόπιας δόσης (1Χ).Σε δόση 0,1Χ, μεταξύ των προνυμφών που τρέφονταν με γύρη που έλαβαν θεραπεία με mancozeb και myclobutanil, το 33,33% των ενηλίκων ήταν θηλυκά, το 22% των ενηλίκων ήταν θηλυκά, το 44% των ενήλικων προνυμφών ήταν θηλυκές, το 44% των ενήλικων προνυμφών ήταν θηλυκές.θηλυκές, το 41% των ενήλικων προνυμφών ήταν θηλυκά και οι έλεγχοι ήταν 31% (Εικ. 3α).Σε 0,5 φορές μεγαλύτερη δόση, το 33% των ενήλικων σκουληκιών στην ομάδα mancozeb και pyrithiostrobin ήταν θηλυκά, 36% στην ομάδα trifloxystrobin, 41% στην ομάδα myclobutanil και 46% στην ομάδα cyprostrobin.Το ποσοστό αυτό ήταν 53% στην ομάδα.στην ομάδα captan και 38% στην ομάδα ελέγχου (Εικ. 3β).Σε δόση 1Χ, το 30% της ομάδας mancozeb ήταν γυναίκες, το 36% της ομάδας πυριθειοστροβίνης, το 44% της ομάδας τριφλοξυστροβίνης, το 38% της ομάδας μυκλοβουτανίλης, το 50% της ομάδας ελέγχου ήταν γυναίκες - 38,5% (Εικ. 3γ) .
Ποσοστό θηλυκών και αρσενικών τρυπητών μετά από έκθεση σε μυκητοκτόνο στο στάδιο της προνύμφης.(α) Χαμηλή δόση (0,1Χ).(β) Μισή δόση (0,5Χ).(γ) Δόση πεδίου ή πλήρης δόση (1Χ).
Η ανάλυση της αλληλουχίας 16S έδειξε ότι η βακτηριακή ομάδα διέφερε μεταξύ των προνυμφών που τρέφονταν με γύρη που είχε υποστεί αγωγή με mancozeb και των προνυμφών που τρέφονταν με μη επεξεργασμένη γύρη (Εικ. 4α).Ο μικροβιακός δείκτης των μη επεξεργασμένων προνυμφών που τρέφονταν με γύρη ήταν υψηλότερος από αυτόν των προνυμφών που τρέφονταν με γύρη που είχε υποστεί αγωγή με mancozeb (Εικ. 4β).Αν και η παρατηρούμενη διαφορά στον πλούτο μεταξύ των ομάδων δεν ήταν στατιστικά σημαντική, ήταν σημαντικά χαμηλότερη από αυτή που παρατηρήθηκε για τις προνύμφες που τρέφονταν με μη επεξεργασμένη γύρη (Εικ. 4γ).Η σχετική αφθονία έδειξε ότι η μικροχλωρίδα των προνυμφών που τρέφονταν με γύρη ελέγχου ήταν πιο διαφοροποιημένη από εκείνη των προνυμφών που τρέφονταν με προνύμφες που είχαν υποστεί αγωγή με mancozeb (Εικ. 5α).Η περιγραφική ανάλυση αποκάλυψε την παρουσία 28 γενών σε δείγματα ελέγχου και σε αγωγή με mancozeb (Εικ. 5β).γ Η ανάλυση με χρήση αλληλουχίας 18S δεν αποκάλυψε σημαντικές διαφορές (Συμπληρωματικό Σχήμα 2).
Τα προφίλ SAV που βασίζονται σε αλληλουχίες 16S συγκρίθηκαν με τον πλούτο Shannon και παρατηρήθηκε πλούτος σε επίπεδο φυλής.(α) Κύρια ανάλυση συντεταγμένων (PCoA) με βάση τη συνολική δομή της μικροβιακής κοινότητας σε προνύμφες που τρέφονται με γύρη ή ελέγχου (μπλε) και προνύμφες που τρέφονται με mancozeb (πορτοκαλί).Κάθε σημείο δεδομένων αντιπροσωπεύει ένα ξεχωριστό δείγμα.Το PCoA υπολογίστηκε χρησιμοποιώντας την απόσταση Bray-Curtis της πολυμεταβλητής κατανομής t.Τα οβάλ αντιπροσωπεύουν το επίπεδο εμπιστοσύνης 80%.(β) Boxplot, ακατέργαστα δεδομένα περιουσίας Shannon (πόντους) και γ.Παρατηρήσιμος πλούτος.Τα τετραγωνίδια εμφανίζουν πλαίσια για διάμεση γραμμή, διατεταρτημόριο εύρος (IQR) και 1,5 × IQR (n = 3).
Σύνθεση μικροβιακών κοινοτήτων προνυμφών που τρέφονται με γύρη που έχει υποστεί αγωγή με mancozeb και χωρίς θεραπεία.(α) Η σχετική αφθονία μικροβιακών γενών διαβάζεται στις προνύμφες.(β) Θερμικός χάρτης εντοπισμένων μικροβιακών κοινοτήτων.Delftia (αναλογία πιθανοτήτων (OR) = 0,67, P = 0,0030) και Pseudomonas (OR = 0,3, P = 0,0074), Microbacterium (OR = 0,75, P = 0,0617) (OR = 1,5, P = 0,0060);Οι σειρές του χάρτη θερμότητας ομαδοποιούνται χρησιμοποιώντας απόσταση συσχέτισης και μέση συνδεσιμότητα.
Τα αποτελέσματά μας δείχνουν ότι η από του στόματος έκθεση σε μυκητοκτόνα επαφής (mancozeb) και συστηματικά (pyrostrobin και trifloxystrobin), που εφαρμόζονται ευρέως κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας, μείωσε σημαντικά την αύξηση βάρους και αύξησε τη θνησιμότητα των προνυμφών αραβοσίτου.Επιπλέον, το mancozeb μείωσε σημαντικά την ποικιλομορφία και τον πλούτο του μικροβιώματος κατά το προνεαικό στάδιο.Το Myclobutanil, ένα άλλο συστηματικό μυκητοκτόνο, μείωσε σημαντικά την αύξηση του σωματικού βάρους των προνυμφών και στις τρεις δόσεις.Αυτό το αποτέλεσμα ήταν εμφανές στο δεύτερο (ημέρα 5) και στο τρίτο (ημέρα 8) χρονικά σημεία.Αντίθετα, το cyprodinil και το captan δεν μείωσαν σημαντικά την αύξηση βάρους ή την επιβίωση σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου.Από ό,τι γνωρίζουμε, αυτή η εργασία είναι η πρώτη που προσδιορίζει τα αποτελέσματα των ποσοστών χωραφιών διαφορετικών μυκητοκτόνων που χρησιμοποιούνται για την προστασία των καλλιέργειες καλαμποκιού μέσω άμεσης έκθεσης στη γύρη.
Όλες οι θεραπείες με μυκητοκτόνα μείωσαν σημαντικά την αύξηση του σωματικού βάρους σε σύγκριση με τις θεραπείες ελέγχου.Το Mancozeb είχε τη μεγαλύτερη επίδραση στην αύξηση του σωματικού βάρους των προνυμφών με μέση μείωση 51%, ακολουθούμενη από την πυριθειοστροβίνη.Ωστόσο, άλλες μελέτες δεν έχουν αναφέρει δυσμενείς επιδράσεις των δόσεων των μυκητοκτόνων στο αγρό στα στάδια των προνυμφών44.Αν και τα βιοκτόνα διθειοκαρβαμιδικών έχουν αποδειχθεί ότι έχουν χαμηλή οξεία τοξικότητα45, τα διθειοκαρβαμικά αιθυλενίου (EBDCS) όπως το mancozeb μπορούν να αποικοδομηθούν σε θειούχο αιθυλένιο ουρίας.Δεδομένων των μεταλλαξιογόνων επιδράσεών του σε άλλα ζώα, αυτό το προϊόν αποδόμησης μπορεί να είναι υπεύθυνο για τις παρατηρούμενες επιδράσεις46,47.Προηγούμενες μελέτες έχουν δείξει ότι ο σχηματισμός αιθυλενοθειουρίας επηρεάζεται από παράγοντες όπως η αυξημένη θερμοκρασία48, τα επίπεδα υγρασίας49 και η διάρκεια αποθήκευσης του προϊόντος50.Οι κατάλληλες συνθήκες αποθήκευσης για τα βιοκτόνα μπορούν να μετριάσουν αυτές τις παρενέργειες.Επιπλέον, η Ευρωπαϊκή Αρχή για την Ασφάλεια των Τροφίμων έχει εκφράσει ανησυχία για την τοξικότητα της πυριθειοπίδης, η οποία έχει αποδειχθεί ότι είναι καρκινογόνος για το πεπτικό σύστημα άλλων ζώων51.
Η από του στόματος χορήγηση mancozeb, pyrithiostrobin και trifloxystrobin αυξάνει τη θνησιμότητα των προνυμφών του καλαμποκιού.Αντίθετα, η μυκλοβουτανίλη, η σιπροκυκλίνη και η καπτάνη δεν είχαν καμία επίδραση στη θνησιμότητα.Αυτά τα αποτελέσματα διαφέρουν από αυτά των Ladurner et al.52, οι οποίοι έδειξαν ότι ο captan μείωσε σημαντικά την επιβίωση του ενήλικου O. lignaria και του Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae).Επιπλέον, έχει βρεθεί ότι τα μυκητοκτόνα όπως το captan και το boscalid προκαλούν θνησιμότητα προνυμφών52,53,54 ή αλλάζουν τη συμπεριφορά σίτισης55.Αυτές οι αλλαγές, με τη σειρά τους, μπορούν να επηρεάσουν τη θρεπτική ποιότητα της γύρης και τελικά το ενεργειακό κέρδος του σταδίου της προνύμφης.Η θνησιμότητα που παρατηρήθηκε στην ομάδα ελέγχου ήταν σύμφωνη με άλλες μελέτες 56,57.
Η ευνοϊκή αναλογία φύλου που παρατηρείται στην εργασία μας μπορεί να εξηγηθεί από παράγοντες όπως το ανεπαρκές ζευγάρωμα και οι κακές καιρικές συνθήκες κατά τη διάρκεια της ανθοφορίας, όπως προτάθηκε προηγουμένως για το O. cornuta από τους Vicens και Bosch.Αν και τα θηλυκά και τα αρσενικά στη μελέτη μας είχαν τέσσερις ημέρες για να ζευγαρώσουν (μια περίοδος που γενικά θεωρείται επαρκής για επιτυχημένο ζευγάρωμα), μειώσαμε σκόπιμα την ένταση του φωτός για να ελαχιστοποιήσουμε το άγχος.Ωστόσο, αυτή η τροποποίηση ενδέχεται να επηρεάσει ακούσια τη διαδικασία ζευγαρώματος61.Επιπλέον, οι μέλισσες βιώνουν αρκετές ημέρες δυσμενών καιρικών συνθηκών, συμπεριλαμβανομένης της βροχής και των χαμηλών θερμοκρασιών (<5°C), οι οποίες μπορούν επίσης να επηρεάσουν αρνητικά την επιτυχία του ζευγαρώματος4,23.
Αν και η μελέτη μας επικεντρώθηκε σε ολόκληρο το μικροβίωμα της προνύμφης, τα αποτελέσματά μας παρέχουν πληροφορίες για πιθανές σχέσεις μεταξύ βακτηριακών κοινοτήτων που μπορεί να είναι κρίσιμες για τη διατροφή των μελισσών και την έκθεση σε μυκητοκτόνα.Για παράδειγμα, οι προνύμφες που τρέφονταν με γύρη που είχε υποστεί αγωγή με mancozeb είχαν σημαντικά μειωμένη δομή και αφθονία της μικροβιακής κοινότητας σε σύγκριση με τις προνύμφες που τρέφονταν χωρίς θεραπεία με γύρη.Στις προνύμφες που κατανάλωναν μη επεξεργασμένη γύρη, οι βακτηριακές ομάδες Proteobacteria και Actinobacteria ήταν κυρίαρχες και ήταν κυρίως αερόβιες ή προαιρετικά αερόβιες.Τα βακτήρια Delft, που συνήθως συνδέονται με μεμονωμένα είδη μελισσών, είναι γνωστό ότι έχουν αντιβιοτική δράση, υποδεικνύοντας έναν πιθανό προστατευτικό ρόλο έναντι των παθογόνων.Ένα άλλο βακτηριακό είδος, το Pseudomonas, ήταν άφθονο σε προνύμφες που τρέφονταν χωρίς θεραπεία με γύρη, αλλά μειώθηκε σημαντικά στις προνύμφες που έλαβαν θεραπεία με mancozeb.Τα αποτελέσματά μας υποστηρίζουν προηγούμενες μελέτες που προσδιορίζουν το Pseudomonas ως ένα από τα πιο άφθονα γένη στο O. bicornis35 και σε άλλες μοναχικές σφήκες34.Αν και δεν έχουν μελετηθεί πειραματικά στοιχεία για το ρόλο του Pseudomonas στην υγεία του O. cornifrons, αυτό το βακτήριο έχει αποδειχθεί ότι προάγει τη σύνθεση προστατευτικών τοξινών στο σκαθάρι Paederus fuscipes και προάγει τον μεταβολισμό της αργινίνης in vitro 35, 65. Αυτές οι παρατηρήσεις προτείνουν έναν πιθανό ρόλο στην ιική και βακτηριακή άμυνα κατά τη διάρκεια του χρόνου ανάπτυξης των προνυμφών O. cornifrons.Το Microbacterium είναι ένα άλλο γένος που εντοπίστηκε στη μελέτη μας και αναφέρεται ότι υπάρχει σε υψηλούς αριθμούς σε προνύμφες μαύρων μυγών στρατιωτών σε συνθήκες πείνας66.Στις προνύμφες O. cornifrons, τα μικροβακτήρια μπορεί να συμβάλλουν στην ισορροπία και την ανθεκτικότητα του μικροβιώματος του εντέρου υπό συνθήκες στρες.Επιπλέον, ο Rhodococcus βρίσκεται στις προνύμφες O. cornifrons και είναι γνωστός για τις αποτοξινωτικές του ικανότητες67.Το γένος αυτό απαντάται και στο έντερο του A. florea, αλλά σε πολύ μικρή αφθονία68.Τα αποτελέσματά μας καταδεικνύουν την παρουσία πολλαπλών γενετικών παραλλαγών σε πολυάριθμα μικροβιακά taxa που μπορούν να αλλάξουν τις μεταβολικές διεργασίες στις προνύμφες.Ωστόσο, απαιτείται καλύτερη κατανόηση της λειτουργικής ποικιλομορφίας του O. cornifrons.
Συνοπτικά, τα αποτελέσματα υποδεικνύουν ότι το mancozeb, το pyrithiostrobin και το trifloxystrobin μείωσαν την αύξηση του σωματικού βάρους και αύξησαν τη θνησιμότητα των προνυμφών του καλαμποκιού.Αν και υπάρχει αυξανόμενη ανησυχία για τις επιδράσεις των μυκητοκτόνων στους επικονιαστές, υπάρχει ανάγκη να κατανοηθούν καλύτερα οι επιδράσεις των υπολειμματικών μεταβολιτών αυτών των ενώσεων.Αυτά τα αποτελέσματα μπορούν να ενσωματωθούν σε συστάσεις για προγράμματα ολοκληρωμένης διαχείρισης επικονιαστών που βοηθούν τους αγρότες να αποφεύγουν τη χρήση ορισμένων μυκητοκτόνων πριν και κατά την άνθηση των οπωροφόρων δέντρων επιλέγοντας μυκητοκτόνα και διαφοροποιώντας το χρόνο εφαρμογής ή ενθαρρύνοντας τη χρήση λιγότερο επιβλαβών εναλλακτικών λύσεων 36. Αυτές οι πληροφορίες είναι σημαντική για την ανάπτυξη συστάσεων.σχετικά με τη χρήση φυτοφαρμάκων, όπως η προσαρμογή των υπαρχόντων προγραμμάτων ψεκασμού και η αλλαγή του χρόνου ψεκασμού κατά την επιλογή μυκητοκτόνων ή η προώθηση της χρήσης λιγότερο επικίνδυνων εναλλακτικών.Απαιτείται περαιτέρω έρευνα σχετικά με τις δυσμενείς επιδράσεις των μυκητοκτόνων στην αναλογία φύλων, τη συμπεριφορά σίτισης, το μικροβίωμα του εντέρου και τους μοριακούς μηχανισμούς που κρύβονται πίσω από την απώλεια βάρους και τη θνησιμότητα του τρυπητή καλαμποκιού.
Τα δεδομένα πηγής 1, 2 και 3 στα σχήματα 1 και 2 έχουν κατατεθεί στο αποθετήριο δεδομένων figshare DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 και https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233.Οι αλληλουχίες που αναλύθηκαν στην τρέχουσα μελέτη (Εικ. 4, 5) είναι διαθέσιμες στο αποθετήριο NCBI SRA με αριθμό πρόσβασης PRJNA1023565.
Bosch, J. and Kemp, WP Ανάπτυξη και καθιέρωση ειδών μελισσών ως επικονιαστών γεωργικών καλλιεργειών: το παράδειγμα του γένους Osmia.(Hymenoptera: Megachilidae) και οπωροφόρα δέντρα.ταύρος.Ntomore.πόρος.92, 3–16 (2002).
Parker, MG et al.Πρακτικές επικονίασης και αντιλήψεις εναλλακτικών επικονιαστών μεταξύ των καλλιεργητών μήλων στη Νέα Υόρκη και την Πενσυλβάνια.εκσυγχρονίζω.Γεωργία.συστήματα τροφίμων.35, 1–14 (2020).
Koch I., Lonsdorf EW, Artz DR, Pitts-Singer TL και Ricketts TH Οικολογία και οικονομία της επικονίασης αμυγδάλου με χρήση γηγενών μελισσών.J. Οικονομικά.Ntomore.111, 16–25 (2018).
Lee, E., He, Y., and Park, Y.-L.Επιδράσεις της κλιματικής αλλαγής στη φαινολογία του τραγόπανου: επιπτώσεις στη διαχείριση του πληθυσμού.Αναρρίχηση.Αλλαγή 150, 305–317 (2018).
Artz, DR και Pitts-Singer, TL Επίδραση μυκητοκτόνου και επικουρικών ψεκασμών στη συμπεριφορά φωλεοποίησης δύο διαχειριζόμενων μοναχικών μελισσών (Osmia lignaria και Megachile rotundata).PloS One 10, e0135688 (2015).
Beauvais, S. et al.Ένα χαμηλής τοξικότητας μυκητοκτόνο καλλιεργειών (φενβουκοναζόλη) παρεμβαίνει στα σήματα αναπαραγωγικής ποιότητας των αρσενικών με αποτέλεσμα μειωμένη επιτυχία ζευγαρώματος σε άγριες μοναχικές μέλισσες.J. Apps.οικολογία.59, 1596–1607 (2022).
Sgolastra F. et al.Τα νεονικοτινοειδή εντομοκτόνα και η βιοσύνθεση της εργοστερόλης καταστέλλουν τη θνησιμότητα από συνεργιστικά μυκητοκτόνα σε τρία είδη μελισσών.Έλεγχος παρασίτων.η επιστήμη.73, 1236–1243 (2017).
Kuhneman JG, Gillung J, Van Dyck MT, Fordyce RF.και οι προνύμφες μονήρης σφήκας Danforth BN αλλάζουν τη βακτηριακή ποικιλότητα που παρέχεται από τη γύρη στις μέλισσες Osmia cornifrons (Megachilidae) που φωλιάζουν με στελέχη.εμπρός.μικροοργανισμός.13, 1057626 (2023).
Dharampal PS, Danforth BN και Steffan SA Οι εκτοσυμβιωτικοί μικροοργανισμοί στη ζυμωμένη γύρη είναι εξίσου σημαντικοί για την ανάπτυξη των μοναχικών μελισσών όσο και η ίδια η γύρη.οικολογία.εξέλιξη.12. e8788 (2022).
Kelderer M, Manici LM, Caputo F και Thalheimer M. Φύτευση μεταξύ σειρών σε οπωρώνες μηλιάς για τον έλεγχο των ασθενειών επανασποράς: μια πρακτική μελέτη αποτελεσματικότητας βασισμένη σε μικροβιακούς δείκτες.Plant Soil 357, 381–393 (2012).
Martin PL, Kravchik T., Khodadadi F., Achimovich SG και Peter KA Πικρή σήψη μήλων στο μέσο του Ατλαντικού Ηνωμένες Πολιτείες: αξιολόγηση των αιτιολογικών ειδών και η επίδραση των τοπικών καιρικών συνθηκών και της ευαισθησίας της ποικιλίας.Phytopathology 111, 966–981 (2021).
Cullen MG, Thompson LJ, Carolan JK, Stout JK.και Stanley DA Μυκητοκτόνα, ζιζανιοκτόνα και μέλισσες: μια συστηματική ανασκόπηση της υπάρχουσας έρευνας και μεθόδων.PLoS One 14, e0225743 (2019).
Pilling, ED και Jepson, PC Συνεργικές επιδράσεις μυκητοκτόνων EBI και πυρεθροειδών εντομοκτόνων σε μέλισσες (Apis mellifera).βλάπτει την επιστήμη.39, 293-297 (1993).
Mussen, EC, Lopez, JE and Peng, CY Επίδραση επιλεγμένων μυκητοκτόνων στην ανάπτυξη και ανάπτυξη προνυμφών μελισσών Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae).Τετάρτη.Ntomore.33, 1151-1154 (2004).
Van Dyke, M., Mullen, E., Wickstead, D., and McArt, S. Decision Guide for Pesticide Use to Protect Pollinators in Tree Orchards (Πανεπιστήμιο Cornell, 2018).
Iwasaki, JM and Hogendoorn, K. Έκθεση μελισσών σε μη φυτοφάρμακα: ανασκόπηση μεθόδων και αναφερόμενων αποτελεσμάτων.Γεωργία.οικοσύστημα.Τετάρτη.314, 107423 (2021).
Kopit AM, Klinger E, Cox-Foster DL, Ramirez RA.και Pitts-Singer TL Επίδραση του τύπου προσφοράς και της έκθεσης σε φυτοφάρμακα στην ανάπτυξη των προνυμφών της Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae).Τετάρτη.Ntomore.51, 240–251 (2022).
Kopit AM και Pitts-Singer TL Μονοπάτια έκθεσης σε φυτοφάρμακα σε μοναχικές μέλισσες με άδεια φωλιά.Τετάρτη.Ntomore.47, 499–510 (2018).
Pan, ΝΤ et αϊ.Ένα νέο πρωτόκολλο βιοδοκιμασίας κατάποσης για την αξιολόγηση της τοξικότητας των φυτοφαρμάκων σε ενήλικες ιαπωνικές μέλισσες κήπου (Osmia cornifrons).η επιστήμη.Αναφορές 10, 9517 (2020).
Ώρα δημοσίευσης: 14 Μαΐου 2024