Μια σειρά πιλοτικών δοκιμών σε καλύβες διεξήχθη στο Khowe, στο νότιο Μπενίν, για την αξιολόγηση της βιολογικής αποτελεσματικότητας νέων και δοκιμασμένων σε πεδίο κουνουπιέρων επόμενης γενιάς έναντι φορέων ελονοσίας ανθεκτικών στις πυρεθρίνες. Τα δίχτυα που είχαν παλαιωθεί στο πεδίο απομακρύνθηκαν από τα νοικοκυριά μετά από 12, 24 και 36 μήνες. Κομμάτια ιστού που κόπηκαν από ολόκληρα ITN αναλύθηκαν για τη χημική τους σύνθεση και διεξήχθησαν βιοδοκιμές ευαισθησίας κατά τη διάρκεια κάθε δοκιμής για την αξιολόγηση των αλλαγών στην αντοχή στα εντομοκτόνα στον πληθυσμό φορέων Khowe.
Το Interceptor® G2 ξεπέρασε άλλα ITN, επιβεβαιώνοντας την ανωτερότητα των διχτυών πυρεθροειδών και χλωρφεναπυρίου έναντι άλλων τύπων διχτυών. Μεταξύ των νέων προϊόντων, όλα τα ITN επόμενης γενιάς επέδειξαν καλύτερη βιοαποτελεσματικότητα από το Interceptor®. Ωστόσο, το μέγεθος αυτής της βελτίωσης μειώθηκε μετά τη γήρανση στο πεδίο λόγω της μικρότερης ανθεκτικότητας των μη πυρεθροειδών ενώσεων. Αυτά τα αποτελέσματα υπογραμμίζουν την ανάγκη βελτίωσης της εντομοκτόνου ανθεκτικότητας των ITN επόμενης γενιάς.
ΕντομοκτόνοΟι επεξεργασμένες κουνουπιέρες (ITN) έχουν διαδραματίσει κρίσιμο ρόλο στη μείωση της νοσηρότητας και της θνησιμότητας από ελονοσία τα τελευταία 20 χρόνια. Από το 2004, περισσότερα από 3 δισεκατομμύρια ITN έχουν διανεμηθεί παγκοσμίως και μελέτες μοντελοποίησης υποδηλώνουν ότι το 68% των κρουσμάτων ελονοσίας στην υποσαχάρια Αφρική αποτράπηκαν μεταξύ 2000 και 2015. Δυστυχώς, η αντοχή των πληθυσμών φορέων της ελονοσίας στα πυρεθροειδή (η τυπική κατηγορία εντομοκτόνων που χρησιμοποιούνται στις ITN) έχει αυξηθεί σημαντικά, απειλώντας την αποτελεσματικότητα αυτής της απαραίτητης παρέμβασης. Ταυτόχρονα, η πρόοδος στον έλεγχο της ελονοσίας έχει επιβραδυνθεί παγκοσμίως, με ορισμένες χώρες με υψηλό φορτίο να βιώνουν αύξηση των κρουσμάτων ελονοσίας από το 2015. Αυτές οι τάσεις έχουν οδηγήσει στην ανάπτυξη μιας νέας γενιάς καινοτόμων προϊόντων ITN που στοχεύουν στην αντιμετώπιση της απειλής της αντοχής στα πυρεθροειδή και συμβάλλουν στη μείωση αυτού του φορτίου και στην επίτευξη φιλόδοξων παγκόσμιων στόχων.
Αυτή τη στιγμή, υπάρχουν στην αγορά τρία νέας γενιάς ITN, καθένα από τα οποία συνδυάζει ένα πυρεθροειδές με ένα άλλο εντομοκτόνο ή συνεργιστικό, ικανό να ξεπεράσει την αντοχή στα πυρεθροειδή σε φορείς ελονοσίας. Τα τελευταία χρόνια, έχουν διεξαχθεί ορισμένες τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές (RCT) σε ομάδες για την αξιολόγηση της επιδημιολογικής αποτελεσματικότητας αυτών των διχτυών σε σύγκριση με τα τυπικά δίχτυα μόνο με πυρεθροειδή και για την παροχή των απαραίτητων στοιχείων που υποστηρίζουν τις συστάσεις του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (ΠΟΥ). Οι δίχτυα κρεβατιού που συνδυάζουν πυρεθροειδή με πιπερονυλοβουτοξείδιο (PBO), ένα συνεργιστικό που ενισχύει την αποτελεσματικότητα των πυρεθροειδών αναστέλλοντας τα ένζυμα αποτοξίνωσης κουνουπιών, ήταν τα πρώτα που προτάθηκαν από τον ΠΟΥ, αφού δύο προϊόντα (Olyset® Plus και PermaNet® 3.0) επέδειξαν ανώτερο επιδημιολογικό αντίκτυπο σε σύγκριση με τις δίχτυα κρεβατιού μόνο με πυρεθροειδή σε τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές σε ομάδες στην Τανζανία και την Ουγκάντα. Ωστόσο, απαιτούνται περισσότερα δεδομένα για να προσδιοριστεί η αξία των διχτυών κρεβατιού με πυρεθροειδή-PBO για τη δημόσια υγεία στη Δυτική Αφρική, όπου η σοβαρή αντοχή στα πυρεθροειδή μπορεί να μειώσει τα οφέλη τους σε σύγκριση με τις δίχτυα κρεβατιού μόνο με πυρεθροειδή.
Η εντομοκτόνος ανθεκτικότητα των ITNs αξιολογείται συνήθως με την περιοδική συλλογή διχτυών από κοινότητες και τη δοκιμή τους σε εργαστηριακές βιοδοκιμές χρησιμοποιώντας στελέχη κουνουπιών που έχουν εκτραφεί σε έντομα. Ενώ αυτές οι δοκιμασίες είναι χρήσιμες για τον χαρακτηρισμό της βιοδιαθεσιμότητας και της αποτελεσματικότητας των εντομοκτόνων στην επιφάνεια των διχτυών κρεβατιού με την πάροδο του χρόνου, παρέχουν περιορισμένες πληροφορίες σχετικά με τη συγκριτική αποτελεσματικότητα διαφορετικών τύπων διχτυών κρεβατιού επόμενης γενιάς, επειδή οι μέθοδοι και τα στελέχη κουνουπιών που χρησιμοποιούνται πρέπει να προσαρμόζονται στον τρόπο δράσης των εντομοκτόνων που περιέχουν. Η πειραματική δοκιμή σε καλύβα είναι μια εναλλακτική προσέγγιση που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη συγκριτική αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των διχτυών που έχουν υποστεί επεξεργασία με εντομοκτόνο σε μελέτες ανθεκτικότητας υπό συνθήκες που μιμούνται τις φυσικές αλληλεπιδράσεις μεταξύ άγριων κουνουπιών-ξενιστών και οικιακών διχτυών κατά τη χρήση. Πράγματι, πρόσφατες μελέτες μοντελοποίησης που χρησιμοποιούν εντομολογικά υποκατάστατα για επιδημιολογικά δεδομένα έχουν δείξει ότι η θνησιμότητα των κουνουπιών και οι ρυθμοί σίτισης που μετρήθηκαν σε αυτές τις δοκιμές μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την πρόβλεψη της επίδρασης των ITNs στην επίπτωση και τον επιπολασμό της ελονοσίας σε τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές σε ομάδες. Έτσι, οι πειραματικές δοκιμές σε καλύβες, στις οποίες οι λεμφαδένες που έχουν υποστεί επεξεργασία με εντομοκτόνο και συλλεχθεί στο πεδίο περιλαμβάνονται σε τυχαιοποιημένες ελεγχόμενες δοκιμές σε ομάδες, μπορούν να παράσχουν πολύτιμα δεδομένα σχετικά με τη συγκριτική βιοαποτελεσματικότητα και την εντομοκτόνο ανθεκτικότητα των λεμφαδένων που έχουν υποστεί επεξεργασία με εντομοκτόνο κατά την αναμενόμενη διάρκεια ζωής τους και να βοηθήσουν στην ερμηνεία των επιδημιολογικών αποτελεσμάτων αυτών των μελετών.
Η πειραματική δοκιμή σε καλύβα είναι μια τυποποιημένη προσομοίωση ανθρώπινης κατοικίας που συνιστάται από τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας των κουνουπιέρων που έχουν υποστεί επεξεργασία με εντομοκτόνα. Αυτές οι δοκιμές αναπαράγουν τις πραγματικές συνθήκες έκθεσης που αντιμετωπίζουν τα κουνούπια όταν αλληλεπιδρούν με τις οικιακές κουνουπιέρες και ως εκ τούτου αποτελούν μια εξαιρετικά κατάλληλη προσέγγιση για την αξιολόγηση της βιολογικής αποτελεσματικότητας των χρησιμοποιημένων κουνουπιέρων κατά την αναμενόμενη διάρκεια ζωής τους.
Αυτή η μελέτη αξιολόγησε την εντομολογική αποτελεσματικότητα τριών διαφορετικών τύπων εντομοκτόνων κουνουπιέρων νέας γενιάς (PermaNet® 3.0, Royal Guard® και Interceptor® G2) υπό συνθήκες πεδίου σε πειραματικούς αχυρώνες και τις συνέκρινε με ένα τυπικό δίχτυ μόνο με πυρεθρίνη (Interceptor®). Όλες αυτές οι κουνουπιέρες που έχουν υποστεί επεξεργασία με εντομοκτόνο περιλαμβάνονται στον προ-επιλεγμένο κατάλογο του ΠΟΥ για τον έλεγχο φορέων. Λεπτομερή χαρακτηριστικά κάθε κουνουπιέρας παρέχονται παρακάτω:
Τον Μάρτιο του 2020, πραγματοποιήθηκε μια μεγάλης κλίμακας εκστρατεία διανομής κουνουπιέρων παλαιωμένης σε χωριά με καλύβες στην επαρχία Zou, στο νότιο Μπενίν, για πιλοτικές δοκιμές σε καλύβες. Οι κουνουπιέρες Interceptor®, Royal Guard® και Interceptor® G2 επιλέχθηκαν από τυχαία επιλεγμένες συστάδες στους δήμους Kove, Zagnanado και Ouinhi, στο πλαίσιο μιας μελέτης παρατήρησης ανθεκτικότητας που ενσωματώθηκε σε μια τυχαιοποιημένη ελεγχόμενη δοκιμή συστάδας για την αξιολόγηση της επιδημιολογικής αποτελεσματικότητας των κουνουπιέρων διπλής επεξεργασίας με εντομοκτόνο. Οι κουνουπιέρες PermaNet® 3.0 συλλέχθηκαν στο χωριό Avokanzun κοντά στους δήμους Jija και Bohicon (7°20′ Β, 1°56′ Α) και διανεμήθηκαν ταυτόχρονα με τις κουνουπιέρες συστάδας RCT κατά τη διάρκεια της μαζικής εκστρατείας του 2020 του Εθνικού Προγράμματος Ελέγχου της Ελονοσίας. Το Σχήμα 1 δείχνει τις τοποθεσίες των συστάδων/χωριών μελέτης όπου συλλέχθηκαν οι διαφορετικοί τύποι ITN σε σχέση με τις πειραματικές τοποθεσίες των καλύβων.
Διεξήχθη πιλοτική δοκιμή σε καλύβα για να συγκριθεί η εντομολογική απόδοση των ITN Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® και Interceptor® G2 όταν αφαιρέθηκαν από τα νοικοκυριά 12, 24 και 36 μήνες μετά τη διάδοση. Σε κάθε ετήσιο χρονικό σημείο, η απόδοση των παλαιωμένων ITN στο πεδίο συγκρίθηκε με νέα, αχρησιμοποίητα δίχτυα κάθε τύπου και μη επεξεργασμένα δίχτυα ως αρνητικό έλεγχο. Σε κάθε ετήσιο χρονικό σημείο, συνολικά 54 επαναλαμβανόμενα δείγματα παλαιωμένων ITN στο πεδίο και 6 νέα ITN κάθε τύπου δοκιμάστηκαν σε 1 ή 2 επαναλαμβανόμενες δοκιμές σε καλύβα με ημερήσια εναλλαγή θεραπειών. Πριν από κάθε δοκιμή σε καλύβα, μετρήθηκε ο μέσος δείκτης πορώδους των παλαιωμένων διχτυών πεδίου κάθε τύπου ITN σύμφωνα με τις συστάσεις του ΠΟΥ. Για την προσομοίωση της φθοράς από την καθημερινή χρήση, όλα τα νέα ITN και τα μη επεξεργασμένα δίχτυα ελέγχου τρυπήθηκαν με έξι οπές 4 x 4 cm: δύο σε κάθε μακρύ πλευρικό πάνελ και μία σε κάθε κοντό πλευρικό πάνελ, σύμφωνα με τις συστάσεις του ΠΟΥ. Η κουνουπιέρα εγκαταστάθηκε μέσα στην καλύβα δένοντας τις άκρες των φύλλων της στέγης με σχοινιά σε καρφιά στις άνω γωνίες των τοίχων της καλύβας. Οι ακόλουθες επεξεργασίες αξιολογήθηκαν σε κάθε δοκιμή καλύβας:
Τα δίχτυα που είχαν παλαιωθεί στο πεδίο αξιολογήθηκαν σε πειραματικές καλύβες την ίδια χρονιά που αφαιρέθηκαν. Οι δοκιμές σε καλύβες διεξήχθησαν στην ίδια τοποθεσία από τον Μάιο έως τον Σεπτέμβριο του 2021, από τον Απρίλιο έως τον Ιούνιο του 2022 και από τον Μάιο έως τον Ιούλιο του 2023, με τα δίχτυα να αφαιρούνται μετά από 12, 24 και 36 μήνες αντίστοιχα. Κάθε δοκιμή διήρκεσε έναν πλήρη κύκλο θεραπείας (54 νύχτες σε διάστημα 9 εβδομάδων), εκτός από τους 12 μήνες, όταν διεξήχθησαν δύο διαδοχικοί κύκλοι θεραπείας για την αύξηση του μεγέθους του δείγματος κουνουπιών. Ακολουθώντας ένα σχέδιο λατινικού τετραγώνου, οι θεραπείες εναλλάσσονταν εβδομαδιαίως μεταξύ των πειραματικών καλυβών για τον έλεγχο των επιπτώσεων στην τοποθεσία της καλύβας, ενώ οι εθελοντές εναλλάσσονταν καθημερινά για τον έλεγχο των διαφορών στην ελκυστικότητα των κουνουπιών των μεμονωμένων ξενιστών. Τα κουνούπια συλλέχθηκαν 6 ημέρες την εβδομάδα. Την 7η ημέρα, πριν από τον επόμενο κύκλο εναλλαγής, οι καλύβες καθαρίστηκαν και αερίστηκαν για την πρόληψη της προσβολής.
Τα κύρια τελικά σημεία αποτελεσματικότητας για την πειραματική αγωγή σε καλύβα κατά των κουνουπιών Anopheles gambiae ανθεκτικών στα πυρεθροειδή και τη σύγκριση του ITN επόμενης γενιάς με το δίχτυ Interceptor® που περιέχει μόνο πυρεθροειδή ήταν:
Τα δευτερεύοντα τελικά σημεία αποτελεσματικότητας για την πειραματική αγωγή σε καλύβα έναντι των κουνουπιών Anopheles gambiae ανθεκτικών στα πυρεθροειδή ήταν τα εξής:
Περιορισμός (%) – μείωση του ποσοστού εισόδου στην ομάδα που έλαβε θεραπεία σε σύγκριση με την ομάδα που δεν έλαβε θεραπεία. Ο υπολογισμός έχει ως εξής:
όπου Tu είναι ο αριθμός των κουνουπιών που περιλαμβάνονται στην ομάδα ελέγχου που δεν έχει υποστεί αγωγή και Tt είναι ο αριθμός των κουνουπιών που περιλαμβάνονται στην ομάδα που έχει υποστεί αγωγή.
Ρυθμός αποχώρησης (%) – Ρυθμός αποχώρησης λόγω πιθανού ερεθισμού από την επεξεργασία, εκφρασμένος ως ποσοστό των κουνουπιών που συλλέγονται στο μπαλκόνι.
Ο συντελεστής καταστολής της αιμορραγίας (%) είναι η μείωση του ποσοστού των κουνουπιών που ρουφούν αίμα στην ομάδα που έλαβε αγωγή σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου που δεν έλαβε αγωγή. Η μέθοδος υπολογισμού έχει ως εξής: όπου Bfu είναι το ποσοστό των κουνουπιών που ρουφούν αίμα στην ομάδα ελέγχου που δεν έλαβε αγωγή και Bft είναι το ποσοστό των κουνουπιών που ρουφούν αίμα στην ομάδα που έλαβε αγωγή.
Μείωση γονιμότητας (%) — η μείωση του ποσοστού των γόνιμων κουνουπιών στην ομάδα που έλαβε αγωγή σε σύγκριση με τον μάρτυρα που δεν έλαβε αγωγή. Η μέθοδος υπολογισμού έχει ως εξής: όπου Fu είναι το ποσοστό των γόνιμων κουνουπιών στην ομάδα ελέγχου που δεν έλαβε αγωγή και Ft είναι το ποσοστό των γόνιμων κουνουπιών στην ομάδα που έλαβε αγωγή.
Για την παρακολούθηση των αλλαγών στο προφίλ αντοχής των πληθυσμών φορέων Covè με την πάροδο του χρόνου, ο ΠΟΥ διεξήγαγε βιοδοκιμές in vitro και σε φιαλίδια το ίδιο έτος κάθε πειραματικής δοκιμής σε καλύβα (2021, 2022, 2023) για να αξιολογήσει την ευαισθησία στην AI στα υπό μελέτη ITN και να ενημερώσει την ερμηνεία των αποτελεσμάτων. Στις μελέτες in vitro, τα κουνούπια εκτέθηκαν σε διηθητικά χαρτιά που είχαν υποστεί επεξεργασία με καθορισμένες συγκεντρώσεις άλφα-κυπερμεθρίνης (0,05%) και δελταμεθρίνης (0,05%), και σε φιάλες επικαλυμμένες με καθορισμένες συγκεντρώσεις CFP (100 μg/φιάλη) και PPF (100 μg/φιάλη) για να αξιολογήσει την ευαισθησία σε αυτά τα εντομοκτόνα. Η ένταση της αντοχής στα πυρεθροειδή διερευνήθηκε εκθέτοντας τα κουνούπια σε 5πλάσιες (0,25%) και 10πλάσιες (0,50%) διαφορικές συγκεντρώσεις α-κυπερμεθρίνης και δελταμεθρίνης. Τέλος, η συμβολή της συνέργειας του PBO και της υπερέκφρασης της μονοοξυγενάσης του κυτοχρώματος P450 (P450) στην αντοχή στα πυρεθροειδή αξιολογήθηκε με προ-έκθεση των κουνουπιών σε διαφορετικές συγκεντρώσεις α-κυπερμεθρίνης (0,05%) και δελταμεθρίνης (0,05%), και προ-έκθεση σε PBO (4%). Το διηθητικό χαρτί που χρησιμοποιήθηκε για τη δοκιμή σε σωλήνα του ΠΟΥ αγοράστηκε από το Universiti Sains Malaysia. Τα φιαλίδια δοκιμής βιοδοκιμασίας του ΠΟΥ με χρήση CFP και PPF παρασκευάστηκαν σύμφωνα με τις συστάσεις του ΠΟΥ.
Τα κουνούπια που χρησιμοποιήθηκαν για βιοδοκιμές συλλέχθηκαν στο στάδιο της προνύμφης από σημεία αναπαραγωγής κοντά στις πειραματικές καλύβες και στη συνέχεια εκτράφηκαν μέχρι να γίνουν ενήλικα. Σε κάθε χρονικό σημείο, τουλάχιστον 100 κουνούπια εκτέθηκαν σε κάθε θεραπεία για 60 λεπτά, με 4 επαναλήψεις ανά σωλήνα/φιάλη και περίπου 25 κουνούπια ανά σωλήνα/φιάλη. Για εκθέσεις σε πυρεθροειδή και CFP, χρησιμοποιήθηκαν κουνούπια ηλικίας 3-5 ημερών που δεν είχαν τραφεί, ενώ για την έκθεση σε PPF, χρησιμοποιήθηκαν κουνούπια ηλικίας 5-7 ημερών που ρουφούσαν αίμα για την τόνωση της ωογένεσης και την αξιολόγηση της επίδρασης του PPF στην αναπαραγωγή των κουνουπιών. Παράλληλες εκθέσεις πραγματοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας διηθητικό χαρτί εμποτισμένο με σιλικονούχο λάδι, καθαρό PBO (4%) και φιάλες επικαλυμμένες με ακετόνη ως μάρτυρες. Στο τέλος της έκθεσης, τα κουνούπια μεταφέρθηκαν σε μη επεξεργασμένα δοχεία και εκτέθηκαν σε βαμβάκι εμποτισμένο σε διάλυμα γλυκόζης 10% (w/v). Η θνησιμότητα καταγράφηκε 24 ώρες μετά την έκθεση σε πυρεθροειδή και κάθε 24 ώρες για 72 ώρες μετά την έκθεση σε CFP και PPF. Για την αξιολόγηση της ευαισθησίας στο PPF, τα επιζώντα κουνούπια που είχαν εκτεθεί σε PPF και τα αντίστοιχα αρνητικά δείγματα ελέγχου ανατέμθηκαν μετά την καταγραφή της καθυστερημένης θνησιμότητας, την παρατήρηση της ανάπτυξης των ωοθηκών χρησιμοποιώντας ένα σύνθετο μικροσκόπιο και την αξιολόγηση της γονιμότητας σύμφωνα με το στάδιο ανάπτυξης των ωαρίων Christopher [28, 30]. Εάν τα αυγά αναπτύχθηκαν πλήρως στο στάδιο V του Christopher, τα κουνούπια ταξινομήθηκαν ως γόνιμα και εάν τα αυγά δεν αναπτύχθηκαν πλήρως και παρέμειναν στα στάδια I-IV, τα κουνούπια ταξινομήθηκαν ως στείρα.
Σε κάθε χρονική στιγμή του έτους, κόπηκαν τεμάχια 30 × 30 cm από νέα και παλαιωμένα στο χωράφι δίχτυα στις θέσεις που καθορίζονται στις συστάσεις του ΠΟΥ [22]. Μετά την κοπή, τα δίχτυα επισημάνθηκαν, τυλίχθηκαν σε αλουμινόχαρτο και αποθηκεύτηκαν σε ψυγείο στους 4 ± 2 °C για να αποφευχθεί η μετανάστευση του AI στο ύφασμα. Τα δίχτυα στη συνέχεια στάλθηκαν στο Κέντρο Γεωργικής Έρευνας της Βαλλονίας στο Βέλγιο για χημική ανάλυση, ώστε να μετρηθούν οι αλλαγές στη συνολική περιεκτικότητα σε AI κατά τη διάρκεια της ωφέλιμης ζωής τους. Οι αναλυτικές μέθοδοι που χρησιμοποιήθηκαν (βάσει των μεθόδων που συνιστά η Διεθνής Συνεργατική Επιτροπή για την Ανάλυση Φυτοφαρμάκων) έχουν περιγραφεί προηγουμένως [25, 31].
Για τα δεδομένα των πειραματικών δοκιμών σε καλύβες, ο συνολικός αριθμός ζωντανών/νεκρών, κουνουπιών που δαγκώνουν/δεν δαγκώνουν και γόνιμων/στείρων κουνουπιών στα διαφορετικά διαμερίσματα των καλύβων αθροίστηκε για κάθε θεραπεία σε κάθε δοκιμή για να υπολογιστούν τα διάφορα αναλογικά αποτελέσματα (θνησιμότητα 72 ωρών, δάγκωμα, εξωπαρασιτισμός, καθαρή παγίδευση, γονιμότητα) και τα αντίστοιχα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% (CI). Οι διαφορές μεταξύ των θεραπειών για αυτά τα αναλογικά δυαδικά αποτελέσματα αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας λογιστική παλινδρόμηση, ενώ οι διαφορές για τα αποτελέσματα μέτρησης αναλύθηκαν χρησιμοποιώντας αρνητική διωνυμική παλινδρόμηση. Επειδή διεξήχθησαν δύο κύκλοι εναλλαγής θεραπειών κάθε 12 μήνες και ορισμένες θεραπείες δοκιμάστηκαν σε όλες τις δοκιμές, οι αναλύσεις διείσδυσης κουνουπιών προσαρμόστηκαν για τον αριθμό των ημερών που δοκιμάστηκε κάθε θεραπεία. Το νέο ITN για κάθε αποτέλεσμα αναλύθηκε επίσης για να ληφθεί μια ενιαία εκτίμηση για όλα τα χρονικά σημεία. Εκτός από την κύρια επεξηγηματική μεταβλητή της θεραπείας, κάθε μοντέλο περιελάμβανε την καλύβα, τον κοιμώμενο, την περίοδο δοκιμής, τον δείκτη ανοίγματος ITN και την ημέρα ως σταθερές επιδράσεις για τον έλεγχο της διακύμανσης λόγω διαφορών στην ελκυστικότητα του κάθε κοιμώμενου και της καλύβας, την εποχικότητα, την κατάσταση της κουνουπιέρας και την υπερβολική διασπορά. Οι αναλύσεις παλινδρόμησης παρήγαγαν προσαρμοσμένους λόγους πιθανοτήτων (ORs) και αντίστοιχα διαστήματα εμπιστοσύνης 95% για την εκτίμηση της επίδρασης του ITN νέας γενιάς σε σύγκριση με το δίχτυ Interceptor® που περιέχει μόνο πυρεθροειδή, στα πρωτεύοντα αποτελέσματα της θνησιμότητας και της γονιμότητας των κουνουπιών. Οι τιμές P από τα μοντέλα χρησιμοποιήθηκαν επίσης για την αντιστοίχιση συμπαγών γραμμάτων που υποδεικνύουν στατιστική σημαντικότητα στο επίπεδο 5% για όλες τις συγκρίσεις ανά ζεύγη των πρωτευόντων και δευτερευόντων αποτελεσμάτων. Όλες οι αναλύσεις παλινδρόμησης πραγματοποιήθηκαν στην έκδοση 18 του Stata.
Η ευαισθησία των πληθυσμών φορέων Covese ερμηνεύτηκε με βάση τη θνησιμότητα και τη γονιμότητα που παρατηρήθηκαν in vitro και σε βιολογικές δοκιμασίες σε φιάλες σύμφωνα με τις συστάσεις του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας. Τα αποτελέσματα της χημικής ανάλυσης παρείχαν συνολική περιεκτικότητα σε AI σε θραύσματα ITN, η οποία χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό του ποσοστού διατήρησης AI σε δίχτυα παλαιωμένα στο πεδίο σε σύγκριση με τα νέα δίχτυα σε κάθε χρονικό σημείο κάθε έτους. Όλα τα δεδομένα καταγράφηκαν χειροκίνητα σε τυποποιημένες φόρμες και στη συνέχεια καταχωρήθηκαν διπλά σε μια βάση δεδομένων του Microsoft Excel.
Οι Επιτροπές Δεοντολογίας του Υπουργείου Υγείας του Μπενίν (Αρ. 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), της Σχολής Υγιεινής και Τροπικής Ιατρικής του Λονδίνου (LSHTM) (Αρ. 16237) και του Παγκόσμιου Οργανισμού Υγείας (Αρ. ERC.0003153) ενέκριναν τη διεξαγωγή μιας πιλοτικής δοκιμής σε καλύβα με τη συμμετοχή εθελοντών. Ελήφθη γραπτή ενημερωμένη συγκατάθεση από όλους τους εθελοντές πριν από τη συμμετοχή τους στη μελέτη. Όλοι οι εθελοντές έλαβαν δωρεάν χημειοπροφύλαξη για τη μείωση του κινδύνου ελονοσίας και μια νοσοκόμα ήταν σε υπηρεσία καθ' όλη τη διάρκεια της δοκιμής για να αξιολογήσει κάθε εθελοντή που εμφάνισε συμπτώματα πυρετού ή ανεπιθύμητης αντίδρασης στο υπό δοκιμή προϊόν.
Τα πλήρη αποτελέσματα από τις πειραματικές καλύβες, που συνοψίζουν τον συνολικό αριθμό ζωντανών/νεκρών, πεινασμένων/αιματοτρεφόμενων και γόνιμων/στείρων κουνουπιών για κάθε πειραματική ομάδα, καθώς και περιγραφικά στατιστικά στοιχεία παρουσιάζονται ως συμπληρωματικό υλικό (Πίνακας S1).
Σε μια πειραματική καλύβα στην Κόουα του Μπενίν, καταστάλθηκε η αιματοχυσία άγριων κουνουπιών Anopheles gambiae ανθεκτικών στα πυρεθροειδή. Δεδομένα από μη επεξεργασμένους μάρτυρες και νέα δίχτυα συγκεντρώθηκαν από δοκιμές για να παρέχουν μια ενιαία εκτίμηση αποτελεσματικότητας. Με ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης, οι στήλες με κοινά γράμματα δεν διέφεραν σημαντικά στο επίπεδο του 5% (p > 0,05). Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν διαστήματα εμπιστοσύνης 95%.
Θνησιμότητα άγριων κουνουπιών Anopheles gambiae ανθεκτικών στα πυρεθροειδή που εισέρχονται σε πειραματική καλύβα στην Κόβα του Μπενίν. Δεδομένα από μη επεξεργασμένους μάρτυρες και νέα δίχτυα συγκεντρώθηκαν από δοκιμές για να παρέχουν μια ενιαία εκτίμηση της αποτελεσματικότητας. Με λογιστική ανάλυση παλινδρόμησης, οι στήλες με κοινά γράμματα δεν διέφεραν σημαντικά στο επίπεδο του 5% (p > 0,05). Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν διαστήματα εμπιστοσύνης 95%.
Ο λόγος πιθανοτήτων περιγράφει τη διαφορά στη θνησιμότητα με τις κουνουπιέρες νέας γενιάς σε σύγκριση με τις κουνουπιέρες που περιέχουν μόνο πυρεθροειδή. Η διακεκομμένη γραμμή αντιπροσωπεύει λόγο πιθανοτήτων 1, που υποδηλώνει καμία διαφορά στη θνησιμότητα. Ένας λόγος πιθανοτήτων > 1 υποδηλώνει υψηλότερη θνησιμότητα με τις κουνουπιέρες νέας γενιάς. Τα δεδομένα για τις κουνουπιέρες νέας γενιάς συγκεντρώθηκαν από δοκιμές για να προκύψει μια ενιαία εκτίμηση αποτελεσματικότητας. Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν διαστήματα εμπιστοσύνης 95%.
Παρόλο που το Interceptor® επέδειξε τη χαμηλότερη θνησιμότητα από όλα τα ITN που δοκιμάστηκαν, η γήρανση στο πεδίο δεν επηρέασε αρνητικά τον αντίκτυπό του στη θνησιμότητα των φορέων. Στην πραγματικότητα, το νέο Interceptor® είχε ως αποτέλεσμα θνησιμότητα 12%, ενώ τα δίχτυα που είχαν παλαιωθεί στο πεδίο παρουσίασαν μικρή βελτίωση στους 12 μήνες (17%, p=0,006) και 24 μήνες (17%, p=0,004), πριν επιστρέψουν σε επίπεδα παρόμοια με τα νέα δίχτυα στους 36 μήνες (11%, p=0,05). Αντίθετα, τα ποσοστά θνησιμότητας για την επόμενη γενιά διχτυών που είχαν υποστεί επεξεργασία με εντομοκτόνο μειώθηκαν σταδιακά με την πάροδο του χρόνου μετά την ανάπτυξη. Η μείωση ήταν πιο έντονη με το Interceptor® G2, όπου η θνησιμότητα μειώθηκε από 58% με τα νέα πλέγματα σε 36% στους 12 μήνες (p< 0,001), 31% στους 24 μήνες (p< 0,001), και 20% στους 36 μήνες (p< 0,001). Το νέο PermaNet® 3.0 είχε ως αποτέλεσμα τη μείωση της θνησιμότητας στο 37%, η οποία επίσης μειώθηκε σημαντικά στο 20% στους 12 μήνες (p< 0,001), 16% στους 24 μήνες (p< 0,001), και 18% στους 36 μήνες (p< 0,001). Παρόμοια τάση παρατηρήθηκε και με το Royal Guard®, με το νέο πλέγμα να οδηγεί σε μείωση της θνησιμότητας κατά 33%, ακολουθούμενη από σημαντική μείωση στο 21% στους 12 μήνες (p< 0,001), 17% στους 24 μήνες (p< 0,001) και 15% στους 36 μήνες (p< 0,001).
Μείωση της γονιμότητας άγριων κουνουπιών Anopheles gambiae ανθεκτικών στα πυρεθροειδή που εισέρχονται σε πειραματική καλύβα στο Kwa του Μπενίν. Δεδομένα από μη επεξεργασμένους μάρτυρες και νέα δίχτυα συγκεντρώθηκαν από δοκιμές για να παρέχουν μια ενιαία εκτίμηση της αποτελεσματικότητας. Οι ράβδοι με κοινά γράμματα δεν διέφεραν σημαντικά στο επίπεδο του 5% (p > 0,05) με ανάλυση λογιστικής παλινδρόμησης. Οι ράβδοι σφάλματος αντιπροσωπεύουν διαστήματα εμπιστοσύνης 95%.
Οι λόγοι πιθανοτήτων περιγράφουν τη διαφορά στη γονιμότητα με τις κουνουπιέρες νέας γενιάς σε σύγκριση με τις κουνουπιέρες που περιέχουν μόνο πυρεθροειδή. Η διακεκομμένη γραμμή αντιπροσωπεύει μια αναλογία 1, που υποδηλώνει ότι δεν υπάρχει διαφορά στη γονιμότητα. Λόγοι πιθανοτήτων< 1 υποδηλώνει μεγαλύτερη μείωση της γονιμότητας με τα δίχτυα νέας γενιάς. Τα δεδομένα για τις κουνουπιέρες νέας γενιάς συγκεντρώθηκαν από δοκιμές για να προκύψει μια ενιαία εκτίμηση αποτελεσματικότητας. Οι γραμμές σφάλματος αντιπροσωπεύουν διαστήματα εμπιστοσύνης 95%.
Ώρα δημοσίευσης: 17 Φεβρουαρίου 2025